FoxM1在慢性鼻—鼻窦炎中的表达及炎性因子等对其调节的研究

发布时间：2017-05-13 19:24

  本文关键词：FoxM1在慢性鼻—鼻窦炎中的表达及炎性因子等对其调节的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:检测转录因子叉头框M1(Forkhead box M1,Fox M1)在慢性鼻-鼻窦炎(Chronic rhinosinusitis,CRS)患者鼻黏膜组织表达情况及炎性细胞因子或细菌毒素对鼻黏膜细胞Fox M1表达的影响,以便了解Fox M1在CRS发病中的作用。方法:取20例不伴息肉CRS患者、20例伴息肉CRS患者和10例单纯鼻中隔偏曲患者的鼻黏膜组织行苏木精-伊红染色(HE染色),查看各组织病理特点,并行免疫组化、实时荧光定量PCR检测组织中Fox M1的水平,对所得数据之间关系进行统计分析。体外培养人鼻黏膜上皮细胞,对所培养细胞运用免疫荧光染色法进行鉴定,稳定传代后设立实验组及空白对照组,实验组分别给予活化因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)、葡萄球菌肠毒素B(SEB)后,应用实时定量PCR法、Western Blot法检测实验组及空白对照组Fox M1的表达情况。结果:HE染色示CRS患者鼻黏膜上皮细胞及黏膜下腺体增生,黏膜下组织内可见大量炎症细胞浸润。免疫组化结果示两组CRS患者的鼻黏膜组织中Fox M1的表达均较对照组升高(P0.05)。两组CRS患者之间Fox M1的表达差异无统计学意义(P0.05)。荧光定量PCR结果显示两组CRS患者的鼻黏膜组织中Fox M1 m RNA的表达均较对照组上调(P0.05),而两组CRS之间差异无统计学意义(P0.05)。建立原代鼻黏膜上皮细胞培养模型,经细胞角蛋白AE1抗体免疫荧光染色证实为上皮源性后进一步实验。对稳定传代的细胞给予IL-1β、IL-4、IL-5、IL-17、IFN-γ、SEB刺激后,荧光定量PCR及蛋白免疫印迹实验检测示Fox M1的基因及蛋白表达水平均较空白对照组上调,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:在CRS中Fox M1的表达上调,且多种细胞因子及细菌毒素可诱导鼻黏膜上皮细胞Fox M1表达的增多,Fox M1可能参与了CRS的发病过程,其具体的机制仍有待进一步的研究。
【关键词】：慢性鼻-鼻窦炎 叉头框M1 白细胞介素 葡萄球菌肠毒素B 原代鼻黏膜上皮细胞
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R765.21
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第1章 前言9-11
• 第2章 FoxM1 在伴与不伴息肉CRS患者中的表达情况11-22
• 2.1 材料及方法11-18
• 2.1.1 标本的来源与分组11
• 2.1.2 标本的采集与处理11-12
• 2.1.3 实验仪器12
• 2.1.4 实验试剂12-13
• 2.1.5 溶液配制13-14
• 2.1.6 实验步骤14-17
• 2.1.7 数据处理与统计分析17-18
• 2.2 结果18-22
• 2.2.1 HE染色18-19
• 2.2.2 免疫组织化学染色19-20
• 2.2.3 实时荧光定量PCR20-22
• 第3章 原代鼻黏膜上皮细胞的体外培养及相关实验22-50
• 3.1 材料及方法22-29
• 3.1.1 实验材料22-25
• 3.1.2 实验步骤25-29
• 3.1.3 数据处理与统计分析29
• 3.2 结果29-50
• 3.2.1 原代鼻黏膜上皮细胞的培养及鉴定29-30
• 3.2.2 不同活化因子对鼻黏膜上皮细胞FoxM1 mRNA表达的影响30-43
• 3.2.3 不同活化因子对鼻黏膜上皮细胞FoxM1 蛋白表达的影响43-50
• 第4章 讨论50-55
• 4.1 FoxM1 在慢性呼吸道疾病中的相关研究50-51
• 4.2 炎性细胞因子、细菌毒素在CRS发病机制中的相关研究51-55
• 第5章 结论55-56
• 致谢56-57
• 参考文献57-60
• 攻读学位期间的研究成果60-61
• 综述61-66
• 参考文献65-66

【参考文献】

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本文编号：363445