H 2 S对H 2 O 2 和MNU诱导视网膜氧化损伤保护作用的研究
发布时间：2024-11-26 22:34
研究背景:视网膜是人体中耗氧量最高的组织之一,视网膜氧平衡对视网膜稳态至关重要。近期研究发现,视网膜内的氧化平衡被破坏可能导致光感受器细胞损失的进一步发展。硫化氢（H2S）作为一种小气体信号分子,可通过Nrf2途径来调控机体的抗氧化能力和抗炎症能力,而使用H2S作为保护视网膜的研究尚少,并未见到使用H2S通过Nrf2途径来发挥保护作用及其具体机制的研究报道。研究目的:基于现有文献和我们实验室前期工作的发现,以Nrf2途径作为信号分子靶标,开展了使用H2S是否能保护视网膜细胞免受氧化损伤的相关研究,并探究其作用机制。研究方法:1.体内模型:选用Sprague-Dawley（SD）大鼠为研究对象,通过腹腔注射N-甲基-N-亚硝基脲（MNU）和硫氢化钠（NaHS）对大鼠进行处理,眼球、肾脏和肝脏用于HE染色并显微镜观察损伤,构建视网膜损伤的动物模型,考察H2S在体内对视网膜损伤的保护作用,并采用MDA和SOD检测试剂盒检测体内MDA和SOD的变化,用ELISA方法检测体内IL-1α和T...
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩写
第一章 前言
1.1 视网膜及其相关疾病
1.1.1 视网膜疾病简介
1.1.2 视网膜色素上皮细胞模型和MNU诱导的视网膜色素变性(RP)模型
1.2 视网膜疾病产生的相关因素以及治疗手段
1.2.1 氧化胁迫
1.2.2 高糖环境(细胞)
1.2.3 炎症反应
1.2.4 蓝光
1.2.5 治疗视网膜疾病的方式
1.3 硫化氢(H2S)与视网膜氧化损伤的保护作用
1.3.1 硫化氢简介
1.3.2 视网膜组织中的硫化氢产生方式
1.3.3 硫化氢供体
1.3.4 硫化氢对视网膜的生理功能影响
1.3.5 硫化氢对视网膜疾病的影响
1.3.6 硫化氢的抗氧化途径通过Nrf2来调控视网膜的抗氧化能力
1.4 立题依据及研究意义
第二章 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 药物和化合物
2.1.2 主要实验试剂
2.1.3 主要实验试剂配置
2.1.4 主要实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 实验动物饲养及分组
2.2.2 MNU诱导的大鼠视网膜变性模型
2.2.3 组织HE染色病理分析
2.2.4 动物视网膜组织MDA检测
2.2.5 动物视网膜组织SOD检测
2.2.6 酶联免疫分析法(ELISA)检测大鼠血清IL-1、TNF-α
2.2.7 免疫组化
2.2.8 细胞冻存与复苏
2.2.9 细胞培养
2.2.10 实验分组
2.2.11 MTT检测
2.2.12 AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡
2.2.13 胞内ROS检测
2.2.14 胞内SOD检测
2.2.15 酶联免疫分析法(ELISA)检测胞内IL-1、TNF-α
2.2.16 mRNA的表达(q-PCR)
2.2.17 蛋白免疫印迹法(Western blot)
2.3 技术路线
第三章 结果与分析
3.1 H2S可减轻MNU诱导的大鼠视网膜细胞损伤和使视网膜变薄
3.2 H2S可以减少MNU诱导的视网膜氧化损伤
3.3 H2S可以减少MNU诱导的视网膜炎症
3.4 H2S可以增加MNU诱导的视网膜Nrf2的蛋白表达
3.5 H2S可以保护ADR诱导产生的视网膜细胞损伤
3.6 H2S减少过氧化氢处理的人ARPE-19细胞凋亡
3.7 H2S可以降低过氧化氢处理的ARPE-19的氧化损伤
3.8 H2S可以降低过氧化氢处理的ARPE-19细胞的炎症因子的释放
3.9 H2S可以增加过氧化氢处理ARPE-19细胞Nrf2的mRNA和蛋白表达
3.10 H2S通过Nrf2途径减少过氧化氢处理的ARPE-19的细胞损伤
3.11 H2S通过Nrf2途径减少过氧化氢处理的ARPE-19的细胞凋亡
3.12 H2S通过Nrf2途径可以降低过氧化氢处理的ARPE-19的氧化损伤
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献(Reference)
在学期间的研究成果
致谢
本文编号：4012694
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩写
第一章 前言
1.1 视网膜及其相关疾病
1.1.1 视网膜疾病简介
1.1.2 视网膜色素上皮细胞模型和MNU诱导的视网膜色素变性(RP)模型
1.2 视网膜疾病产生的相关因素以及治疗手段
1.2.1 氧化胁迫
1.2.2 高糖环境(细胞)
1.2.3 炎症反应
1.2.4 蓝光
1.2.5 治疗视网膜疾病的方式
1.3 硫化氢(H2S)与视网膜氧化损伤的保护作用
1.3.1 硫化氢简介
1.3.2 视网膜组织中的硫化氢产生方式
1.3.3 硫化氢供体
1.3.4 硫化氢对视网膜的生理功能影响
1.3.5 硫化氢对视网膜疾病的影响
1.3.6 硫化氢的抗氧化途径通过Nrf2来调控视网膜的抗氧化能力
1.4 立题依据及研究意义
第二章 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 药物和化合物
2.1.2 主要实验试剂
2.1.3 主要实验试剂配置
2.1.4 主要实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 实验动物饲养及分组
2.2.2 MNU诱导的大鼠视网膜变性模型
2.2.3 组织HE染色病理分析
2.2.4 动物视网膜组织MDA检测
2.2.5 动物视网膜组织SOD检测
2.2.6 酶联免疫分析法(ELISA)检测大鼠血清IL-1、TNF-α
2.2.7 免疫组化
2.2.8 细胞冻存与复苏
2.2.9 细胞培养
2.2.10 实验分组
2.2.11 MTT检测
2.2.12 AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡
2.2.13 胞内ROS检测
2.2.14 胞内SOD检测
2.2.15 酶联免疫分析法(ELISA)检测胞内IL-1、TNF-α
2.2.16 mRNA的表达(q-PCR)
2.2.17 蛋白免疫印迹法(Western blot)
2.3 技术路线
第三章 结果与分析
3.1 H2S可减轻MNU诱导的大鼠视网膜细胞损伤和使视网膜变薄
3.2 H2S可以减少MNU诱导的视网膜氧化损伤
3.3 H2S可以减少MNU诱导的视网膜炎症
3.4 H2S可以增加MNU诱导的视网膜Nrf2的蛋白表达
3.5 H2S可以保护ADR诱导产生的视网膜细胞损伤
3.6 H2S减少过氧化氢处理的人ARPE-19细胞凋亡
3.7 H2S可以降低过氧化氢处理的ARPE-19的氧化损伤
3.8 H2S可以降低过氧化氢处理的ARPE-19细胞的炎症因子的释放
3.9 H2S可以增加过氧化氢处理ARPE-19细胞Nrf2的mRNA和蛋白表达
3.10 H2S通过Nrf2途径减少过氧化氢处理的ARPE-19的细胞损伤
3.11 H2S通过Nrf2途径减少过氧化氢处理的ARPE-19的细胞凋亡
3.12 H2S通过Nrf2途径可以降低过氧化氢处理的ARPE-19的氧化损伤
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献(Reference)
在学期间的研究成果
致谢
本文编号：4012694
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