MEG3抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖

发布时间：2017-06-23 19:14

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【摘要】：目的 :探讨母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)对视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)细胞增殖的影响。方法 :应用实时荧光定量PCR法检测RB细胞SO-RB50和HXO-RB44及正常视网膜色素上皮h TERT RPE-1细胞中MEG3的表达水平。将pc DNAMEG3或si RNA-MEG3分别转染SO-RB50或HXO-RB44细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测细胞中MEG3的表达水平,CCK-8法检测细胞的增殖能力,蛋白质印迹法检测细胞中RB蛋白的表达水平。用不同浓度的5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-Cd R)处理SO-RB50和HXO-RB44细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测细胞中MEG3的表达水平。CCK-8法检测si RNA-MEG3转染10μmol/L 5-Aza-Cd R处理组SO-RB50和HXO-RB44细胞的增殖能力。结果:RB细胞SO-RB50和HXO-RB44中MEG3的表达水平均显著低于正常视网膜色素上皮h TERT RPE-1细胞(P值均0.01)。pc DNA-MEG3转染后,SO-RB50细胞中MEG3和RB蛋白的表达水平上调(P0.01和P0.05),细胞增殖受到抑制(P0.05);si RNA-MEG3转染后,HXO-RB44细胞中MEG3和RB蛋白的表达水平下调(P0.01和P0.05),并促进细胞增殖(P0.05)。5和10μmol/L 5-Aza-Cd R处理后,SO-RB50细胞(P0.05和P0.01)和HXO-RB44细胞(P0.05和P0.01)中MEG3的表达水平上调。si RNA-MEG3转染10μmol/L 5-Aza-Cd R处理组SO-RB50和HXORB44细胞的增殖受到抑制(P值均0.05)。结论 :RB细胞中MEG3表达下调,这可能与DNA甲基化有关。MEG3可能通过促进RB蛋白的表达而抑制RB细胞的增殖。
【作者单位】： 深圳市人民医院眼科;
【关键词】： 视网膜母细胞瘤 细胞增殖 成视网膜细胞瘤蛋白质 长链非编码RNA -氮杂-’-脱氧胞苷
【基金】：深圳市卫生计生系统科研项目(编号:201507010)~~
【分类号】：R739.7
【正文快照】： 方法:应用实时荧光定量PCR法检测RB细胞SO-RB50和HXO-RB44及正常视网膜色素上皮h TERT RPE-1细胞中MEG3的表达水平。将pc DNA-MEG3或si RNA-MEG3分别转染SO-RB50或HXO-RB44细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测细胞中MEG3的表达水平,CCK-8法检测细胞的增殖能力,蛋白质印迹法检测

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