NCX1通道和自噬在高脂血症急性胰腺炎中的相关性研究

发布时间：2018-03-16 01:08

  本文选题：高脂血症　切入点：急性胰腺炎　出处：《西南医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:探讨NCX1通道蛋白及基因、自噬相关蛋白及基因、凋亡通路相关蛋白及基因在高脂血症急性胰腺炎中的相关性;为高脂血症急性胰腺炎的发病机制及病理过程研究补充新的线索。方法:40只健康的清洁级SD成年雄鼠,按照电脑产生的随机数将其分为4个不同的实验组,N=10只,即:急性高脂血症胰腺炎组(A组,N=10),非高脂血症急性胰腺炎组(B组,N=10),高脂血症非急性胰腺炎组(C组,N=10)以及空白对照组(D组,N=10)。用新鲜配制的10%Tyloxapol溶液诱导大鼠高脂血症模型,高脂血症模型创建12小时后,再用3.5%牛黄胆酸钠溶液逆行胰胆管注射诱导大鼠急性胰腺炎模型,待两种模型都建立后12小时,抽取血液标本用于血清学检验,切取胰腺组织标本用于后续实验。血液标本用于检测甘油三酯(TG)、胆固醇(TC),血淀粉酶(AMY),血脂肪酶(LPS)。组织标本一部分用HE染色后进行病理学评分,用于评估组织损伤;另一部分组织用于检测NCX1、LC3Ⅱ、Beclin-1、Caspase-3以及Caspase-9蛋白量变化,通过western-blot技术;再取部分组织,采用实时荧光定量PCR技术(q RT-PCR)检测NCX1、LC3Ⅱ、Beclin-1、Caspase-3以及Caspase-9等指标mRNA的相对表达情况。结果:(1)A组、C组TG、TC较B组、D组显著升高(P0.05);A组与C组TG、TC水平没有明显变化;B组与D组TG、TC水平基本一致(2)A组、B组AMY、LPS水平显著高于C组、D组,差异具有统计学意义(P0.05);A组AMY水平与B组相比,显著升高(P0.05);A组与B组LPS水平没有明显差异;C组与D组AMY、LPS水平基本相同。(3)B组胰腺组织较C组、D组病理组织学评分更高(P0.05);比较A组和B组病理组织学评分,A组明显升高(P0.05);C组与D组胰腺组织病理学评分没有明显差异。(4)B组NCX1、LC3Ⅱ、Beclin-1、Caspase-3以及Caspase-9蛋白及mRNA的相对表达量经GADPH校正与C组、D组进行组间比较,B组的相对表达量明显高于其他两组(P0.05);A组LC3Ⅱ、Beclin-1、Caspase-3以及Caspase-9蛋白及mRNA表达量与B组、C组、D组之间进行两两比较,A组表达量最高(P0.05);A组NCX1蛋白及mRNA表达较C组、D组显著增高,差异具有统计学意义,(P0.05),但与B组相比,没有明显上调;C组NCX1、LC3Ⅱ、Beclin-1、Caspase-3以及Caspase-9与D组相比,蛋白及mRNA表达量基本相同。结论:非高脂血症急性胰腺炎的钙超载有NCX1参与,而对于高脂血症急性胰腺炎而言,NCX1通道并非是起决定性作用的钙离子通道;LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白及基因表达在非高脂血症急性胰腺炎组织显著增高,其在高脂血症急性胰腺炎组织中表达显著高于非高脂血症急性胰腺炎,说明自噬与高脂血症急性胰腺炎密切相关。高脂血症急性胰腺炎Caspase-3、Caspase-9蛋白及基因表达明显上调,凋亡坏死在高脂血症急性胰腺炎更剧烈。
[Abstract]:Objective: to investigate the correlation of NCX1 channel proteins and genes, autophagy associated proteins and genes, apoptotic pathway related proteins and genes in hyperlipidemic acute pancreatitis. Methods 40 healthy adult SD rats of clean grade were divided into 4 different experimental groups according to the random number generated by computer. That is: group A of acute hyperlipidemia pancreatitis, group B of non-hyperlipidemic acute pancreatitis, group C of hyperlipidemia and group C of hyperlipidemia, and group D of blank control group. The hyperlipidemia model of rats was induced by the freshly prepared 10 Tyloxapol solution. After the establishment of hyperlipidemia model 12 hours later, the rat model of acute pancreatitis was induced by retrograde injection of 3.5% sodium taurocholate solution into the pancreatopancreatopancreatic duct. After both models were established, blood samples were collected for serological examination. The pancreatic tissue specimens were harvested for subsequent experiments. The blood samples were used to detect triglyceride TGG, cholesterol TCU, serum amylase amylase, blood lipase LPSN. Some of the tissue samples were stained with HE to evaluate the tissue injury. The other part of the tissue was used to detect the changes of the amount of Caspase-3 and Caspase-9 protein in Beclin-1Caspase-3 of NCX1LC3 鈪，

本文编号：1617641