慢性HBV感染者血清IFN-λs的表达与HBV DNA、HBeAg浓度关系
本文选题：干扰素λ + 慢性HBV感染 ； 参考：《山东大学》2016年硕士论文
【摘要】：目的：通过检测慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染者血清中干扰素λs (Interferon-λ, IFN-λ,包括IFN-λ1, IFN-λ2和IFN-λ3)的表达,并根据血清乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)浓度和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)浓度进行具体分组分析,探讨慢性HBV感染者血清中IFN-λs表达与HBeAg和HBV DNA浓度的关系,为深入了解IFN-λs在HBV感染者体内表达调控特点及机制提供理论依据。方法：1.临床标本收集：选取2014年1月-2016年02月在山东省千佛山医院住院的慢性HBV感染者80例作为实验组,其中又根据HBV DNA定量和HBeAg结果进行具体分组,PCR检测血清HBV DNA浓度,低于检测下限者(100IU/ml)为HBV DNA阴性组,HBV DNA阳性组和HBV DNA阴性组各40例,其中又分别包括HBeAg阳性组和HBeAg阴性组各20例,并且根据HBV DNA浓度梯度分布进行分组分析,另选取20例健康志愿者静脉血作为对照组。用双抗体夹心ELISA法分别检测血清中IFN-λs(含IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ3)水平,分析血清IFN-λs表达与HBV DNA、HBeAg浓度的关系。2. HBV DNA测定：以PCR-荧光探针法检测血清HBV DNA,最低检测下限为100IU/ml,严格按照ABI Prism 7300设定程序进行扩增。3.血清HBV标志物检测：HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe及抗-HBc均用cobase601全自动电化学发光免疫分析仪检测。4. IFN-λs浓度测定：以ELISA法检测血清IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3浓度,试剂盒购自上海源叶股份有限公司,具体操作严格按说明进行。5.统计学分析：采用SPSS17.0统计软件对数据进行统计分析,其中计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,两组间均数的比较采用独立样本t检验(Independent-Sample t Test)的方法,以P0.05为差异有统计学意义。结果：1.与正常对照组相比较,慢性HBV感染组中IFN-λs的表达水平均明显升高,P均0.05,差异有统计学意义。2.HBV DNA阴性患者中HBeAg阳性组IFN-λs的表达水平均明显高于HBeAg阴性组,P均0.05,差异有统计学意义。3.HBV DNA阳性患者中,HBeAg阳性组与HBeAg阴性组IFN-Xs的表达水平未见显著差异(P0.05)；4.HBeAg阳性患者中HBV DNA阳性组IFN-λs表达水平均明显低于HBV DNA阴性组(P均0.01),且HBV DNA阳性患者中,当HBV DNA浓度高于108时,IFN-λs水平均明显降低(P均0.05)。结论：1.本研究慢性HBV感染组IFN-λs表达水平明显高于正常对照组,提示慢性HBV感染可能刺激机体自身IFN-λs的表达。2.当HBV DNA阴性时,HBeAg阳性组IFN-λs的表达水平均明显高于HBeAg阴性组,提示当HBV DNA低于检测下限时,HBeAg阳性组体内可能仍有HBV的低度复制,且能够刺激IFN-λs的表达。3.本研究HBV DNA阳性时HBeAg阳性组与HBeAg阴性组IFN-λs的表达水平未见显著差异,HBeAg阳性患者中,HBV DNA浓度高于108时,IFN-λs表达水平显著下降,提示体内HBV DNA的低度复制可能刺激IFN-λs的表达,但当HBVDNA复制达到一定浓度时可能会抑制IFN-λs的表达,IFN-λs的表达与机体的免疫状态密切相关。
[Abstract]:Objective: to detect the expression of Interferon- 位, IFN- 位, including IFN- 位 _ 1, IFN- 位 _ 2 and IFN- 位 _ 3 in sera of patients with chronic hepatitis B virus hepatitis B virus, HBV). The relationship between the expression of IFN- 位 s and the concentration of HBeAg and HBV DNA in the serum of patients with chronic HBV infection was studied by specific grouping analysis according to the concentration of hepatitis B virus DNA(HBV DNA and the concentration of hepatitis B virus e antigen HBeAg. To provide theoretical basis for further understanding IFN- 位 s expression and regulation characteristics and mechanism in HBV infected persons. Method 1: 1. Clinical specimen collection: 80 cases of chronic HBV infection hospitalized in Qianfushan Hospital of Shandong Province from January 2014 to February 2016 were selected as experimental group, in which serum HBV DNA concentration was detected by specific grouping PCR according to quantitative HBV DNA and HBeAg results. There were 40 cases in HBV DNA negative group and 40 cases in HBV DNA negative group, including 20 cases in HBeAg positive group and 20 cases in HBeAg negative group, respectively. Another 20 healthy volunteers were selected as control group. The level of IFN- 位 s (including IFN- 位 1, IFN- 位 2, IFN- 位 3) in serum was detected by double antibody sandwich ELISA method. The relationship between the expression of IFN- 位 s and the concentration of HBeAg in HBV DNA was analyzed. HBV DNA determination: serum HBV DNA was detected by PCR- fluorescence probe method. The lowest detection limit was 100U / ml, and the amplification was carried out strictly according to the program of ABI Prism 7300. Serum HBV markers were detected by cobase601 automatic electrochemiluminescence immunoassay (cobase601) for detection of HBeAg, anti-HBs, anti-HBe and anti-HBc. Determination of IFN- 位 s concentration: serum IFN- 位 1, IFN- 位 2 and IFN- 位 3 concentrations were detected by ELISA method. The kit was purchased from Shanghai Yuanye Co., Ltd. Statistical analysis: SPSS17.0 statistical software was used to analyze the data, in which the measurement data were expressed as mean 卤standard deviation x 卤s, and the comparison between the two groups was conducted by independent sample t-test method, with P0.05 as the difference. The result is 1: 1. Compared with the normal control group, The expression level of IFN- 位 s in chronic HBV infection group was significantly higher than that in HBeAg negative group (P 0.05), the difference was statistically significant. 2. The expression level of IFN- 位 s in HBeAg positive group was significantly higher than that in HBeAg negative group (P 0.05), the difference was statistically significant. 3. HBV-positive DNA expression in HBeAg positive group was significantly higher than that in HBeAg negative group (P < 0.05). There was no significant difference in the expression of IFN-Xs between HBeAg-positive group and HBeAg negative group. 4. The expression level of IFN- 位 s in HBeAg-positive group was significantly lower than that in HBV DNA negative group (P 0.01), and in HBV DNA positive group, the expression of IFN- 位 s in HBeAg positive group was significantly lower than that in HBV DNA negative group. When the concentration of HBV DNA was higher than 108, the level of IFN- 位 s decreased significantly. Conclusion 1. In this study, the expression of IFN- 位 s in chronic HBV infection group was significantly higher than that in normal control group, suggesting that chronic HBV infection might stimulate the expression of IFN- 位 s. The level of IFN- 位 s expression in HBeAg-positive group was significantly higher than that in HBeAg negative group when HBV DNA was negative, suggesting that there might still be low replication of HBV in HBeAg-positive group when HBV DNA was lower than the lower limit, and it could stimulate the expression of IFN- 位 s. 3. In this study, there was no significant difference in the expression of IFN- 位 s between HBeAg positive group and HBeAg negative group in HBV DNA positive group. The level of IFN- 位 s expression in HBeAg-positive patients was significantly lower than that in HBeAg-positive group, suggesting that the low replication of HBV DNA in vivo might stimulate the expression of IFN- 位 s. However, when HBVDNA replication reached a certain concentration, the expression of IFN- 位 s might be inhibited. The expression of IFN- 位 s might be closely related to the immune state of the body.
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R512.62
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，本文编号：1897257
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