Th22细胞及其细胞因子白介素22在四氯化碳致肝纤维化小鼠模型中的表达和意义

发布时间：2017-03-21 23:10

  本文关键词：Th22细胞及其细胞因子白介素22在四氯化碳致肝纤维化小鼠模型中的表达和意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究Th22细胞及其相关细胞因子白介素22（interleukin-22，IL-22）在四氯化碳（carbon tetrachloride，，CCl4）致肝纤维化小鼠模型中的表达和相互关系，探讨它们是否参与肝纤维化的发病机制。 方法36只雄性BALB/c小鼠分为3组（按随机数字表法）：正常对照组、橄榄油对照组、肝纤维化模型组，每组12只。橄榄油对照组腹腔内注射橄榄油，2mg/kg体重，每周2次；模型组腹腔内注射浓度20%的CCl4(橄榄油配置)，2mg/kg体重，每周2次，8周后处死各组小鼠。HE和Masson染色观察小鼠肝脏病理改变；免疫组织化学染色检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、IL-22的表达；流式细胞术检测小鼠脾脏IL-22+CD4+T细胞、 IL-22+IL-17-IFN-γ-T(Th22)细胞、 IL-17+CD4+T(Th17)细胞、IFN-γ+CD4+T（Th1）细胞的比例；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血IL-22的含量；实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测肝组织IL-22、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）、芳香烃受体(arylhydrocarbon receptor，AhR) mRNA的表达水平；并分析Th22细胞及其相关因子白介素22与肝纤维化的相关性。 结果（1）肝组织病理切片HE染色显示：模型组肝小叶被宽窄不一的纤维间隔分割，纤维隔可见大量炎性细胞及成纤维细胞浸润，肝细胞索排列紊乱，条索状纤维由汇管区伸展向肝小叶，使小叶结构破坏。Masson染色镜下观察可见模型组肝组织汇管区、中央静脉大量胶原纤维沉积，肝小叶被宽窄不一的纤维间隔分割，通过CCl4腹腔注射法成功建立肝纤维化小鼠模型。(2)免疫组织化学染色分析结果显示：模型组α-SMA表达（0.38±0.09）高于正常对照组(0.07±0.03)及橄榄油对照组(0.08±0.03)；模型组肝组织IL-22的表达(0.21±0.05)高于正常对照组(0.06±0.03)及橄榄油对照组(0.07±0.02)，差异均有统计学意义（P均0.05）。（3）流式细胞术分析结果显示肝纤维化模型组小鼠脾脏IL-22+CD4+T细胞比例（8.59±2.00）%较正常对照组（2.40±0.57%）%及橄榄油对照组（2.27±1.21%）%明显升高；Th22细胞比例（8.69±3.27）%较正常对照组（3.28±0.87）%及橄榄油对照组（3.12±1.56）%明显升高；Th17细胞比例（2.02±1.06）%较正常对照组（0.62±0.28）%及橄榄油对照组（0.63±0.25%）%升高；Th1细胞比例（2.35±1.40）%较正常对照组（1.26±0.46）%及橄榄油对照组（1.25±0.52）%升高，差异均有统计学意义（P均0.05）。(4)模型组外周血IL-22的含量(65.08±12.29) pg/ml明显高于正常对照组（24.80±3.66）pg/ml及橄榄油对照组(26.62±8.62) pg/ml，差异有统计学意义（P0.01）。（5）模型组肝组织IL-22mRNA的表达量(3.10±0.60)高于正常对照组（1.01±0.44）及橄榄油对照组(0.99±0.24)；模型组IL-6mRNA的表达量(1.90±0.47)高于正常对照组（0.57±0.16）及橄榄油对照组(0.63±0.26)；模型组TNF-α mRNA的表达量(1.39±0.50)高于正常对照组（0.25±0.11）及橄榄油对照组(0.28±0.09)，差异均有统计学意义；模型组AhR mRNA的表达量(1.52±0.74)亦高于正常对照组（0.80±0.28）及橄榄油对照组(0.79±0.39)，差异均有统计学意义（P均0.05）。（6）模型组小鼠脾脏Th22细胞比例与肝脏α-SMA呈正相关关系(r=0.725，P0.01)，模型组小鼠脾脏Th22细胞比例与外周血IL-22水平呈正相关关系(r=0.660，P0.05)。未发现Th17、Th1细胞比例与血浆IL-22水平有明显相关性。 结论Th22细胞是肝纤维化模型小鼠脾脏中分泌IL-22的主要CD4+T细胞来源，Th22细胞通过分泌IL-22参与肝纤维化过程。
【关键词】：Th22细胞 肝纤维化 白细胞介素22
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575.2
【目录】：

• 中英文对照一览表4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-14
• 材料与方法14-28
• 结果28-41
• 讨论41-49
• 结论49-50
• 参考文献50-55
• 综述55-74
• 参考文献67-74
• 致谢74-75
• 攻读学位期间发表的学术论文75

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 韩雪花;刘立民;张彦明;张兴霞;赵广圣;司叶俊;林国强;何广胜;吴德沛;;骨髓增生异常综合征患者外周血Th22细胞水平的变化及意义[J];中国免疫学杂志;2013年01期

2 杨智;陈洪涛;张毅;吴诗品;;IL-22和IL-17 mRNA在慢性HBV感染者PBMCs中的表达及其意义[J];世界华人消化杂志;2012年34期

3 万姗姗;曹倩;;Th17细胞在炎症性肠病发生过程中的效应应答[J];世界华人消化杂志;2013年07期

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本文编号：260455