Ⅳ型胶原酶门脉灌注对四氯化碳诱导兔肝硬化影响的实验研究

发布时间：2020-04-29 22:55

【摘要】：目的应用四氯化碳(CCI4)皮下注射方法,建立兔肝硬化动物模型。观察IV型胶原酶门脉灌注对肝硬化程度的影响,并检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达与血清基质金属蛋白酶组织抑制物-1 (TIMP-1)变化,了解对于肝星状细胞激活的影响。方法雄性新西兰大白兔随机分为实验组和对照组。实验组臀部皮下注射50%CCI。橄榄油0.23ml/kg,每周2次,对照组注射等量橄榄油。分别于4周、8周、12周末检测各组兔肝脏功能,12周末进行肝组织活检检查组织病理学变化。12周后各组动物均建立门静脉给药通路,将已形成肝硬化并门静脉插管成功的33只兔随机分为两组(组1,组2),组1为16只、组2为17只。组1经门静脉给药通路注入0.1%Ⅳ型胶原酶1.5ml,组2注入等量0.9%氯化钠,5次/周,共4周。将造模对照组中门静脉插管成功的30只兔同样随机分为两组(组3,组4),每组15只,处理方法同前。4周后,将各组动物分别采血检测血清TIMP-1后处死,留取肝脏组织,观察其病理学变化,标本固定后,行α-SMA免疫组织化学染色,行积分光密度、面密度分析。结果随时间延长,实验组兔肝脏纤维化程度逐渐加重,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)明显升高。12周末出现白蛋白/球蛋白比例倒置,可观察到典型肝硬化病理表现,兔肝组织出现典型的假小叶结构,动物死亡率20%,造模成功率83%。对照组肝脏功能正常,肝脏组织学结构正常。肝硬化动物肝脏α-SMA表达显著增强;门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶肝硬化动物肝脏纤维化程度明显降低,但与对照组相比,实验组α-SMA积分光密度为8.460±4.238,对照组为4.090±2.506,二者相比有显著性差异-证明实验组肝脏α-SMA表达显著增强,血清TIMP-1为6.752±0.763ng/ml,较对照组6.165±0.072ng/ml显著升高(P0.05)。结论CCI4皮下注射可成功地建立兔肝硬化动物模型,该方法成功率高,可用于相关实验研究。采用门脉灌注0.1%Ⅳ型胶原酶可显著降低肝纤维化程度,但血清TIMP-1值及肝组织α-SMA表达可显著增高,可能与肝脏肝星状细胞激活有关。
【学位授予单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R575.2

【引证文献】