TLR4介导的BV2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究

发布时间：2020-05-09 21:26

【摘要】：目的通过观察HCV刺激后小鼠小胶质细胞(BV2细胞)TLR4表达变化及其下游细胞因子IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌变化，进而分析两者变化的相关性，初步探讨TLR4是否介导参与中枢神经系统(CNS)抗HCV固有免疫应答及其可能机制。 方法用含20%HCV阳性血清的培养液刺激BV2细胞，，为HCV实验组，并设置正常血清组和空白对照组。应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测刺激6h、12h、18h、24h后TLR4mRNA的相对表达；应用流式细胞术(FCM)、酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测刺激24h后TLR4蛋白及IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12表达水平；通过观察TLR4阻断后各组细胞IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌变化分析两者的相关性。采用单因素方差分析进行多组均数的比较，P0.05为差异具有统计学意义。 结果在BV2细胞中有TLR4mRNA和TLR4蛋白的表达；HCV实验组TLR4mRNA和TLR4蛋白均高于正常血清组及空白对照组，差异有统计学意义(P0.01)，且HCV实验组TLR4mRNA表达24h内呈递增趋势；HCV实验组IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌明显高于正常血清组及空白对照组，差异有统计学意义(P0.01)；HCV实验组TLR4阻断后IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12分泌明显减少，差异有统计学意义(P0.01)，正常血清组和空白对照组阻断TLR4前后无明显变化(P0.05)。 结论HCV阳性血清刺激可引起体外培养的BV2细胞TLR4表达上调，激活细胞因子IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12等分泌发挥抗病毒作用，因此TLR4可能介导参与了CNS抗HCV固有免疫应答过程。
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R512.63

【参考文献】

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本文编号：2656761