HRM技术在炎症性肠病患者TPMT基因多态性的检测中的应用性研究

发布时间：2020-05-20 07:41

【摘要】： 背景:硫唑嘌呤是治疗炎症性肠病的常用免疫抑制剂,由于其严重的骨髓抑制毒副作用,已有的研究显示该药物副作用与硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因突变有关。目的:应用HRM技术检测炎症性肠病患者TPMT基因多态性,探索炎症性肠病(IBD)患者TPMT基因型与硫唑嘌呤(AZA)致骨髓抑制的关系。方法:采集了82例IBD患者和53例健康志愿者的外周血,使用QIAamp DNA Blood Minikit(德国Qiagen公司生产)提取其中的DNA,采用聚合酶链反应-高分辨熔解曲线(PCR-HRM)与Sanger法序列测定相结合的方法,检测上述人群中3种常见的TPMT突变等位基因TPMT*3A(G460A/A719G)、TPMT*3B(G460A)、TPMT*3C(A719G)。结果:临床资料:82例IBD(UC 38例/CD 42例/IC 2例),根据是否使用AZA治疗分为A、B两组。其中A组有31例患者,使用AZA的剂量为50-100mg/d,(男20/女11),平均年龄39.6(18-68)岁。健康对照组为C组(男28/女25),平均年龄41.06(23-68)岁。A组与C组、B组与C组年龄无统计学差异。TPMT基因多态性检测出了TPMT*1/*3C杂合子6例,占4.44%(6/135);IBD患者(A+B组)中TPMT*1/*3C杂合子4例,占4.88%(4/82),TPMT*3C基因频率为2.44%。健康对照者(C组)中TPMT*3C杂合子2例,占3.77%(2/53),TPMT*3C基因频率为1.89%。未检测出TPMT*3A和TPMT*3B型突变。IBD患者的4例出现骨髓抑制的患者中,1例是TPMT*1/*3C杂合子;其余3例为TPMT野生型。另外检测出了TPMT*1S(T474C)突变,IBD患者(A+B组)中TPMT*1S(T474C)纯合型占1.96%,杂合型占35.85%,基因频率为:C19.81%。健康对照组(C组)中TPMT*1S(T474C)纯合型占2.44%,杂合型占39.02%,基因频率为:C 21.95%。结论:存在基因突变的IBD患者对硫唑嘌呤不能耐受,导致骨髓抑制。然而TPMT基因突变可以解释部分AZA治疗IBD导致骨髓抑制的病例,但不能解释大部分病例。
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R574

【引证文献】