丹参素对PDGF-BB刺激下大鼠肝星状细胞的作用研究

发布时间：2020-05-25 20:10

【摘要】：目的：观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）刺激下大鼠肝星状细胞（HSC）活化增殖，Ⅰ、Ⅲ型胶原合成与分泌，细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2）和磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）蛋白表达的影响，探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制。 方法：采用改良式胶原酶-链霉蛋白酶消化法分离大鼠HSC，，α-SMA免疫细胞化学染色鉴定分离的HSC。用不同浓度丹参素（0.25、0.125、0.062mmol/L）、ERK通道特异性抑制剂UO126（20nmol/L）和PI3K通道特异性抑制剂LY294002（20nmol/L）分别作用于PDGF-BB（10ng/ml）诱导的HSC24小时，CCK8法检测HSC增殖活性，免疫化学染色法测定I、Ⅲ型胶原合成，酶联免疫吸附法观察Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌，Western blot测定erk1/2、p-erk1/2、akt和p-akt蛋白表达。 结果：原代分离的HSC约为3.4×107/鼠，存活率大于98％，传一代的HSC纯度大于99％。PDGF-BB10ng/ml处理后，HSC增殖明显增加，丹参素能抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖的作用，并随丹参素浓度增加细胞增殖受到的抑制作用越强（P0.05），Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及分泌均显著减少（P0.05），p-erk1/2和p-akt蛋白表达均显著降低（P0.05）。 结论：原代分离的大鼠HSC是体外研究肝纤维化的重要模型。丹参素可通过抑制PDGF-BB诱导的HSC增殖和活化，同时抑制与肝纤维化密切相关的MAPK、PI3K途径中erk、akt蛋白的磷酸化，负性调控肝纤维化过程，其机制可能与抑制ERK1/2和PI3K信号转导通路有关。
【图文】：

图 1-1 新分离的原代 HSC(×40)Fig1-1 hepatic stellate cells of primaryisolation（×40）图 1-2 原代 HSC 培养 9 天(×100)Fig1-2 HSC after nine days in primaryculture（×100）图 1-3 原代 HSC 培养 9 天(×200)Fig1-3 HSC after nine days in primary图1-4 原代培养9天HSC细胞α-SMA染色鉴定图(×200)

图 1-1 新分离的原代 HSC(×40)Fig1-1 hepatic stellate cells of primaryisolation（×40）图 1-2 原代 HSC 培养 9 天(×100)Fig1-2 HSC after nine days in primaryculture（×100）图 1-3 原代 HSC 培养 9 天(×200)Fig1-3 HSC after nine days in primary图1-4 原代培养9天HSC细胞α-SMA染色鉴定图(×200)
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R285.5;R575.2

【参考文献】

相关期刊论文 前7条

1 李冬;戴立里;余斌斌;姜中华;;丹参素对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及NF-κB活性的影响[J];第三军医大学学报;2009年08期

2 陈达凡;李建英;郑伟达;王小众;;ERK信号通路与肝纤维化[J];国际消化病杂志;2007年05期

3 李金星;朱贤立;李玉;王

本文编号：2680685