液压打击致应激性溃疡大鼠下丘脑IL-6表达及胃粘膜c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路改变的实验研究

发布时间：2020-05-30 16:57

【摘要】： 目的:本实验拟通过建立大鼠颅脑外伤致应激性溃疡模型,探讨(1)胃粘膜血流量、胃液PH值与胃粘膜损伤指数的关系;(2)中枢白介素6在应激大鼠下丘脑的表达,以及参与应激性溃疡发生的机制;(3)c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路激活是否参与了应激性溃疡的形成,以及其通路抑制剂能否减轻胃粘膜的损伤。方法:采用液压打击法建立大鼠颅脑外伤并发应激性溃疡模型,将20只雄性SD大鼠随机等分为对照组、致伤1小时组、致伤6小时组和致伤12小时组,每组5只,测定各组大鼠胃液PH值、胃粘膜血流量、胃粘膜损伤指数,并观察胃粘膜大体及光镜下组织病理学变化。采用免疫组化、Westernblot的方法检测致伤后下丘脑中枢性白介素6的表达与分布;致伤后胃粘膜p-JNK的表达与分布。设立抑制剂组,通过观测抑制剂组胃液PH值、胃粘膜血流量、胃粘膜损伤指数以及胃粘膜大体及光镜下组织病理学变化,明确抑制剂能减轻胃粘膜损伤的作用。结果:(1)致伤后1小时即出现胃粘膜损伤,并且胃粘膜损伤指数随时间的延长而不断增加,损伤程度不断加重;致伤后1小时有血流量的暂时性增加,处于波峰,此后逐渐下降,6小时后趋于平稳,但致伤后6小时和12小时组仍较对照组降低;致伤后1小时胃液PH值明显降低,此后PH值继续下降,到致伤后6小时处于最低点,致伤后12小时胃液PH值较致伤后1小时和6小时有升高,但各组较对照组仍有明显降低;应激性溃疡大鼠胃液PH值与胃粘膜损伤指数不呈完全线性负相关,但各实验组胃液PH值较对照组有明显减低,而胃粘膜血流量与胃粘膜损伤指数呈负相关。(2)IL-6免疫反应阳性细胞广泛分布于应激大鼠下丘脑水平的神经细胞中,在室旁核附近分布尤为密集。(3)免疫组化发现在溃疡损伤部位组织上皮细胞p-JNK呈强烈阳性反应,c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路抑制剂SP600125干预能显著减轻胃粘膜的损伤。结论:(1)本实验通过液压打击致颅脑外伤后建立了脑外伤后应激性溃疡模型。(2)应激性溃疡大鼠胃液PH值与胃粘膜损伤指数不呈完全线性负相关,但各实验组胃液PH值较对照组有明显减低,而胃粘膜血流量与胃粘膜损伤指数呈负相关。(3)中枢IL-6在液压打击致应激性溃疡大鼠下丘脑室旁核(PVN)附近有明显表达,其可能是通过室旁核(PVN)介导中枢胆碱能神经元的兴奋,HPA轴的激活以及5-HT系统的代谢增强,参与应激过程中应激性溃疡发生的某种病理生理机制。(4)在应激性溃疡中c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路被激活,参与了应激性溃疡的发生。(5)JNK信号通路抑制剂SP600125可改善应激性溃疡大鼠胃粘膜的损伤,JNK信号通路抑制剂作为一种有效的手段,有可能对今后应激性溃疡的治疗提供了新的治疗思路,为临床药物的开发提供了重要指引,可能预示着新的治疗策略。
【图文】：

脑外伤,动物模型,液压

液压打击致应激性溃疡大鼠下丘脑工L一6表达及胃粘膜JNK信号通路改变的至颅腔，作用于颅脑组织。压力大小可由打击锤的高度调节，并通过压力波器_匕显示。AIJF一21型激光血流仪:八dvanCe公司产品。Dll一140动物呼吸机:浙江医科大学仪器实验厂一制造。手术器械包:长征医院神经外科实验室自备。天平石蜡切片机牙科钻

埋置,侧面观,大鼠

避免损伤硬脑膜。在前自和人字缝尖附近颅骨外板上固定2枚小螺丝钉，牙托水泥固定打击管后，缝皮待实验(见图1一2)。ld后用液压打击脑外伤动物模型装置以1.satm作打击致伤，，调整打击锤高度，通过液压装置快速地向硬脑膜外腔注入一定量的生理盐水，突然改变密闭颅腔内恒定的压力，使脑组织产生移位和变形，导致颅脑损伤。分别于伤后lh、6h、12卜处死。对照组动物除不致伤外，其余步骤与致伤组完全相同。图1一2埋置打击管大鼠侧面观(习瞳于L、呼吸变化观测致伤组、对照组大鼠呼吸禾一!睦孔变化，呼吸抑制明显者予以DII一lt10动物呼吸机辅助呼吸。(回胃粘膜血流量的测定麻醉后，正中线剖腹并游离出胃，插入ALF一21型激光血流仪探头，分别于胃前后壁、大小弯、幽门前区、贡门下6点测胃粘膜血流量(GMBF)，取其均值，单位为m一/min· /1009组织。(动胃液四值的测定致伤模型制作完成后，将大鼠用1%戊巴比妥钠(4()。 :g/kg)腹腔内注射麻醉
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R573.1;R651.15

【参考文献】