血红素氧合酶-1表达变化对肝硬化门脉高压并发肝性脑病的影响

发布时间：2020-07-19 05:14

【摘要】：背景：肝性脑病（hepatic encephalopathy，HE）是肝硬化的严重并发症。目前，HE的发病机制仍不清楚，临床上缺乏有效治疗手段。我们的前期研究表明血红素氧合酶-1（Heme oxygenase-1，HO-1）参与了肝硬化及肝肾综合征、肝肺综合征等晚期并发症，但HO-1在HE发病中的作用机制还未清楚。目的：研究HO-1表达变化对肝硬化门脉高压并发HE的影响。方法：临床试验：20名健康志愿者（N组)，55名肝硬化患者（C组），63名登记的肝性脑病患者（H组)，分别检测各组的血清碳氧血红蛋白(carboxyhemoglobin，COHb)含量。动物实验：健康雄性SD大鼠46只，将其随机分为5组，即对照组（Sham组）、胆总管结扎所致的门脉高压组（bile duct ligation,BDL组）、予以高氨饮食所致的肝性脑病组（HE组）以及分别抑制和诱导HO-1表达的锌原卟啉组(zincprotoporphyrin，ZnPP组)和钴原卟啉组(cobalt protoporphyrin，CoPP组)。HO-1水平通过免疫印迹法（western blot）和实时定量聚合酶链反应（quantitative real-timePCR，qRT-PCR)检测。此外，还检测门静脉压力（portal vein pressure，PVP）、动脉血COHb、血浆和脑组织氨含量、脑组织含水量、脑组织水通道蛋白-4（Aquaporin-4， AQP-4)的表达情况以及脑组织氧化应激反应程度。结果：临床试验得出COHb含量在N组和C组明显高于H组。动物实验显示HE组大鼠的脑组织HO-1含量及血浆COHb含量明显高于Sham组和BDL组。血COHb、血氨和脑组织氨含量、脑组织含水量、PVP在HE组和CoPP组升高，而在ZnPP组降低。CoPP组脑组织AQP-4表达和氧化应激程度均高于ZnPP组。结论：抑制脑组织HO-1蛋白表达能够减轻大鼠的肝性脑病，其机制可能是减少了星形胶质细胞的AQP-4蛋白表达。
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R575.2;R747.9
【图文】：

自主活动,大鼠,大鼠模型

17除Sham组外，其余各组大鼠均出现不同程度的毛色蓬乱、稀疏，腹部膨隆（见图1A、1B），精神萎靡，进食减少，尿量减少，尿色黄，便色浅。其中HE组和CoPP组大鼠出现步态蹒跚、捕捉反应、疼痛反应迟钝甚至消失，CoPP组大鼠个别甚至出现昏迷，ZnPP组大鼠较HE组明显活跃，活动增多。自主活动实验结果显示：与Sham组大鼠相比，BDL组大鼠自主活动率显著降低(P< 0.01)，HE组大鼠较BDL组自主活动率显著降低（P < 0.01），CoPP组大鼠自主活动率在HE组基础上进一步降低（P < 0.01）,而ZnPP组大鼠自主活动率较HE组显著升高（P < 0.01）。（见图1C）图1 大鼠模型与大鼠自主活动率（night/day）A：Sham组大鼠；B：HE组大鼠；C：大鼠自主活动率（night/day）**p<0.01 vs Sham组；##p<0.01 vs BDL组；$p<0.05,$$p<0.01 vs HE组3.解剖观察除Sham组大鼠打开腹腔后并未见腹水形成

大鼠模型,腹水,大鼠,自主活动

图1 大鼠模型与大鼠自主活动率（night/day）：HE组大鼠；C：大鼠自主活动率（night/day）；##p<0.01 vs BDL组；$p<0.05,$$p<0.01 vs HE组鼠打开腹腔后并未见腹水形成，结扎的胆总管和CoPP组大鼠打开腹腔后均见大量腹水，结扎CoPP组更为明显（见图2），ZnPP组较HE组大鼠也有所减轻。C

氨含量,脑组织,脑组织含水量,氧化应激反应

19图3 各组大鼠血氨与脑组织氨含量**p<0.01vsSham组；#p<0.05,##p<0.01vsBDL组；$p<0.05,$$p<0.01vsHE组8.脑组织含水量的测定与Sham组相比，BDL组大鼠脑组织含水量显著升高，相较于BDL组，HE组脑组织含水量进一步升高，在HE组基础上，脑组织含水量在ZnPP组降低，而在CoPP组升高 (P < 0.01)(见图4)。图4 各组大鼠脑组织水含量**p<0.01 vsSham组；##p<0.01 vsBDL组；$$p<0.01 vsHE组9.氧化应激反应的变化与 Sham 组相比，BDL 组大鼠脑组织 MDA 水平显著升高(P < 0.01)

【参考文献】