阿魏酸通过RhoA信号通路降低肝纤维化大鼠门静脉压力的初步研究

发布时间：2020-07-28 17:00

【摘要】：目的：肝硬化是我国常见疾病和主要死因之一，以肝组织弥漫性纤维化、假小叶形成和再生结节形成为特征。门静脉高压和肝功能损害为其主要表现，因此在深入探索其发病机制的基础上寻找新的治疗靶点十分必要。已有研究发现，RhoA信号通道的激活参与了肝纤维化以及肝硬化门静脉高压的形成，同时可诱导HSC的形态发生改变。阿魏酸可有效降低肝硬化患者门静脉压力，改善肝纤维化指标。但其具体机制尚未阐明。本实验将以RhoA信号通道为切入点，结合肝纤维化及肝硬化门静脉高压的发生机制，以经过阿魏酸治疗的肝纤维化门静脉高压大鼠为研究对象，力图揭示阿魏酸直接降低肝纤维化门静脉压力的分子机制，为临床治疗门静脉高压提供科学依据和新的思路。方法：采用胆管结扎术（BDL）制造大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型。将雄性Wistar大鼠随机分成假手术组（n=24）、BDL组（n=28）和阿魏酸治疗组（n=21）。通过原位肝灌注法分析阿魏酸对肝纤维化大鼠门静脉压力的影响，在此基础上，应用HE染色和免疫组织化学方法，分别证实肝纤维化模型造模成功以及检测肝纤维化大鼠肝组织中-SMA的表达。再利用Western blot方法检测实验大鼠肝组织中RhoA信号通路相关分子的表达变化。另外，采用改良的Friedman法分离培养大鼠正常肝组织中的HSC，运用荧光免疫双标法进行HSC鉴定。结果：本实验采用改良的Friedman法成功分离正常大鼠HSC，并应用荧光免疫双标法进行鉴定。原位肝灌注结果提示阿魏酸可在整体水平降低BDL术后肝纤维化大鼠模型的门静脉压力（相对假手术组，治疗组*p㩳0.05；相对BDL组，治疗组#p㩳0.05)；HE染色显示假手术组无特殊病理改变，而BDL组、阿魏酸治疗组均有不同程度胶原纤维间隔增生，证实肝纤维化模型造模成功；免疫组化方法初步发现肝纤维化大鼠肝组织中-SMA阳性表达的细胞增多。Western blot方法检测三组大鼠肝脏中RhoA信号通路相关分子的表达变化，结果发现：相对假手术组，BDL组大鼠肝组织中RhoA表达增加（*p值均㩳0.05），eNOs、p-eNOs以及p-VASP表达下降（*p值均㩳0.05）；相对BDL组，阿魏酸治疗后，RhoA表达下降（**p值均㩳0.05），eNOs、p-eNOs以及p-VASP表达有增加（**p值均㩳0.05）。结论：阿魏酸可通过干预RhoA信号通道，降低BDL术后肝纤维化大鼠门静脉压力。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R575.2

【相似文献】