H.pylori感染与胃黏膜细胞Foxp3、TGF-β1及IL-10表达关系的研究

发布时间：2020-08-03 15:04

【摘要】： 目的:研究H.pylori感染与胃黏膜细胞Foxp3、TGF-β1、IL-10表达的关系,为支持H.pylori通过诱导Foxp3、TGF-β1及IL-10表达,抑制机体免疫功能,参与免疫逃逸提供实验依据。方法: 1.胃镜下经灭菌活检钳取入选病例胃黏膜组织,经H.pylori分离培养鉴定或特异性PCR联合尿素酶试验将110例入选者分为H.pylori感染阳性组与阴性组,依据胃镜与病理检查分为胃癌组和非胃癌组。 2.采用原位杂交技术检测各组胃窦部黏膜活检组织中Foxp3mRNA、TGF-β1mRNA的表达情况;利用ELISA法检测胃体部黏膜组织IL-10蛋白的含量。 3.建立H.pylori感染胃黏膜上皮细胞株的体外模型。利用ELISA法检测感染细胞培养上清中TGF-β1、IL-10的含量。结果: 1.非胃癌组H.pylori感染率76.3%,胃癌组H.pylori感染率63.3%,总感染率为72.7%。 2. Foxp3mRNA在非胃癌组阳性表达44例,阴性表达36例,在胃癌组阳性表达22例,阴性表达8例,两组间表达率差别无统计学意义(p0.05);在H.pylori感染阳性组阳性表达率67.5%,阴性组阳性表达率为43.3%,两组间表达率差别有显著统计学意义(p0.05)。 3. TGF-β1mRNA在非胃癌组阳性表达51例,阴性表达29例,在胃癌组阳性表达22例,阴性表达8例,两组之间表达率差别无统计学意义(p0.05);在H.pylori感染阳性组表达率为75.0%,阴性组阳性表达率为43.3%,两组间表达率差异具有显著统计学意义(p0.05)。Foxp3mRNA和TGF-β1mRNA表达的相关系数为0.872(p0.01),具有统计学意义。 4. IL-10在H.pylori感染阳性组为3.03±0.88pg/ml; H.pylori感染阴性组为0.82±0.26 pg/ml。H.pylori阳性组IL-10蛋白含量较H.pylori阴性组明显增高(p0.01)。 5. H.pylori体外感染模型细胞培养上清TGF-β1的含量于共培养后迅速开始增高,2h达高峰,高含量一直维持到12h;IL-10含量于共培养后1h时开始增高,1.5h达高峰,随后迅速下降,2h时已降至共培养初始水平,低水平一直维持到12h。结论: 1.山西地区有消化系统症状病人的H.pylori感染率72.7%。 2. H.pylori感染阳性组胃黏膜活检组织Foxp3 mRNA表达水平高于阴性组,提示H.pylori感染的胃黏膜局部聚集较多的Foxp3阳性表达的Treg细胞,参与胃黏膜局部免疫功能的抑制。 3. H.pylori感染阳性组胃黏膜活检组织TGF-β1mRNA与IL-10蛋白表达水平均高于阴性组,H.pylori感染模型细胞培养上清TGF-β1与IL-10表达水平均高于对照组,体内外结果的一致性表明:H.pylori感染可诱导胃黏膜细胞局部TGF-β1与IL-10的分泌。 4. Foxp3mRNA和TGF-β1mRNA的表达可能存在相关性。本研究提示,H.pylori感染机体后,可诱导高表达Foxp3的Treg细胞、TGF-β1与IL-10表达上调,抑制机体胃黏膜局部免疫功能,为H.pylori的持续性感染提供了微环境。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R573
【图文】：

电泳图,电泳,标本,阳性对照

10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 M图 1 H.pylori-cagA-PCR 扩增产物电泳结果1：阳性对照；5：阴性对照；3、4、9、10：阳性标本；2、6、7、8：阴性标本；M：markerbp

电泳图,电泳,标本,阳性对照

10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 M图 1 H.pylori-cagA-PCR 扩增产物电泳结果1：阳性对照；5：阴性对照；3、4、9、10：阳性标本；2、6、7、8：阴性标本；M：markerbp

电泳图,PCR扩增产物,电泳

11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 M图 3 H.pylori-vacA PCR 扩增产物电泳结果1：阳性对照；5：阴性对照；2、3、9、11：阳性标本；4、6、7、8、10：阴性标本；M：marker2.4 H.pylori 感染鉴定参照 H.pylori 感染的科研诊断标准[13]，H.pylori 培养阳性或下列四项断为 H.pylori 感染：(1)H.pylori 形态学(涂片、组织学染色或免疫组化染色)(2)尿素酶依赖性试验(RUT、13C 或 14C—UBT)(3)血清学试验(ELISA 或免疫印迹试验等)(4)特异的 PCR 检测位杂交技术检测胃窦部黏膜组织中 Foxp3mRNA、 TGF-β1mRNA3.1 石蜡切片制备:(1)固定：取-70℃冰箱保存的胃窦部黏膜组织，加入含 0.1％DEP.1MPBS（PH7.0-7.6）固定液，固定 1h；

【参考文献】