Dicer酶在实验性肝纤维化过程中的表达研究

发布时间：2020-08-08 10:48

【摘要】：目的动态观察大鼠肝纤维化过程中Dicer酶在肝脏中的表达情况,初步探讨Dicer与肝纤维化病变进展的关系及其可能的机制。方法 1.建立40%CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型:49只雄性SD大鼠随机分为实验组及对照组,其中实验组和对照组都被分为1周组、2周组、3周组、4周组、5周组、6周组和7周组。实验组给予40%CCl4橄榄油溶液1ml/kg腹腔注射,每周1次,对照组给予同等浓度的生理盐水和橄榄油混悬液腹腔注射。分别于造模第1周至第7周末处死相对应的实验组及对照组大鼠,采集血清标本及肝脏组织标本。 2.对肝组织进行常规HE染色及观察大鼠肝脏组织病理变化情况,评价大鼠肝纤维化程度。 3.检测血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)浓度,评价肝细胞功能状态。 4.采用实时定量反转录PCR (Realtime RT-PCR)方法检测正常对照组及模型组各只大鼠肝脏组织中Dicer的表达。结果 1.实验组大鼠血清中ALT及AST的水平从第二周开始明显升高,与对照组大鼠相比差异有显著性(P0.05)。 2.随着造模时间的延长,对照组大鼠肝脏小叶结构、肝细胞形态大小等无明显改变,未见明显炎症细胞浸润;对实验组大鼠,随着CCl4作用的时间和剂量逐渐增加,大鼠肝纤维化程度逐步加重。 3.在大鼠肝纤维化的过程中,实验组大鼠肝脏组织中的Dicer表达水平从第四周开始升高,在第五周时达到峰值,第六周时Dicer的表达水平又开始下调,根据统计学结论,其差异是有显著性的(P 0.05)。其中,实验组大鼠在第五周时肝脏组织中Dicer的表达明显高于正常对照组织,差异有显著性(P 0.05),在其他各时间点,实验组大鼠肝脏组织中的Dicer表达水平与对照组相比无明显差异(P0.05)。另外,对于对照组大鼠,在各时间点肝脏组织中Dicer的表达水平无明显差异(P0.05)。 4. Spearman秩相关统计分析表明在模型组大鼠肝纤维化过程中,肝脏组织中Dicer的表达水平与大鼠体重和肝功能指标ALT、AST之间无显著相关性(P0.05)。结论 1.在大鼠肝纤维化过程中,肝脏组织中Dicer的表达水平与大鼠体重和肝功能指标ALT、AST之间无显著相关性。 2.在CCl4诱导的大鼠肝纤维化形成过程中,Dicer的表达水平呈一过性升高,提示RNA干扰系统可能参与了肝硬化的发生发展过程。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R575.2

【参考文献】