温生理盐水腹腔灌洗诱导胰腺HSP70表达及对雨蛙素所致大鼠急性胰腺炎的影响

发布时间：2020-08-08 13:37

【摘要】： 背景与目的:热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)是一组广泛存在于自然界原核、真核细胞中,高度保守的细胞保护性蛋白,对细胞的生长、发育、分化及凋亡具有调节作用。当机体受到高温、炎症、缺血、肿瘤等不良刺激,尤其是高温刺激时,会大量表达HSPs以维持细胞形态和功能。近年来一些研究表明,高热刺激(42℃热水浴、电热板加热)、冷水浴(23℃)或药物(异丙肾上腺素、亚砷酸盐或BRX-220)预处理后可诱导动物胰腺内大量表达HSP70和(或)HSP60,从而减轻雨蛙素、牛黄胆酸钠或精氨酸等诱导的大鼠或小鼠胰腺急性炎症反应,改善急性胰腺炎所致的胰腺形态学改变,降低血清淀粉酶及TNF-α、IL-1、IL-6等炎性细胞因子水平。但也有一部分研究结果显示诱导HSP70高表达对急性胰腺炎的保护作用并不明显。因此目前关于HSP70对于急性胰腺炎的保护作用仍无明确结论,而且之前研究中所用诱导HSPs表达的方法在临床实际应用中不易实现。本实验目的在于探讨温生理盐水(42℃)腹腔灌洗这种新的诱导方法对大鼠胰腺内HSP70表达的影响,对雨蛙素诱导的大鼠急性胰腺炎的保护作用及可能存在的机制。 方法:雄性Wistar大鼠,250g左右,72只,随机分为7组。A组(n=6)腹腔麻醉后行假手术,12小时后处死,取胰腺组织用Western blot方法测HSP70。B组(n=36)再随机分成6个亚组,每组6只大鼠,B1组-B6组分别在42℃温生理盐水腹腔灌洗30分钟后的第0、3、6、12、24和36小时处死,取胰腺组织用Western blot方法测HSP70。C组(n=6)禁食12小时后给予腹腔注射常温生理盐水四次,0.25ml/次,每次间隔1小时,于最后一次注射后的第6小时处死。D组(n=6)和E组(n=6)禁食12小时后按20ug/kg剂量给予腹腔注射雨蛙素四次,每次间隔1小时。分别于注射完最后一次后的第6小时和12小时处死。F组和G组先给予温生理盐水腹腔灌洗30分钟,12小时后按D组和E组的方法腹腔注射雨蛙素,并分别于注射完最后一次雨蛙素后的第6小时和12小时处死。C、D、E、F和G五组大鼠处死后均留取血清测淀粉酶、TNF-α、IL-6及TAP,留取胰腺组织行HE染色,观察组织形态学改变。 结果:和A组相比,B组大鼠胰腺内HSP70表达明显升高。灌洗后0小时到12小时HSP70表达逐渐升高,灌洗后12小时表达达到峰值,之后逐渐减少。和C组相比,D、E两组大鼠血清淀粉酶、TNF-α和IL-6水平明显升高。组织形态学上,胰腺炎相关病理改变(水肿、炎症浸润、腺泡坏死、出血和脂肪坏死)评分显著升高。F组较D组相比血清淀粉酶、TNF-α和IL-6浓度下降明显,且胰腺炎相关病理改变明显减轻。G组和E组相比,仅有血清IL-6浓度下降较明显,而组织形态学上水肿和炎症浸润改善不明显。D组和E组血清TAP浓度虽较C组和相应的F组和G组偏高,但差异无统计学意义。 结论:温生理盐水腹腔灌洗可诱导大鼠胰腺内HSP70表达,表达的量随着时间的改变而不同,腹腔灌洗后3小时HSP70表达即有明显增加,到12小时达到峰值,之后逐渐下降。温生理盐水腹腔灌洗预处理对雨蛙素诱导的大鼠急性胰腺炎具有保护作用,可改善胰腺组织形态学改变,降低血清淀粉酶和炎性细胞因子水平。此保护作用可能与其诱导胰腺内HSP70高表达有关,推测可能的机制是诱导胰腺内高表达HSP70可抑制急性胰腺炎发病过程中炎性细胞因子的释放,从而减轻胰腺炎症反应。
【学位授予单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R576
【图文】：

westernblot所测胰腺内HSP7O表达情况

胰腺的腺泡细胞坏死、出血和脂肪坏死这两项上差异有统计学意义，水肿和炎症细胞浸润的减轻无明显差异，但组织形态学总体评分仍较E组明显降低。(见表2.2、图2.6、图2.7)表2.2胰腺组织形态学改变评分分fll水肿月泉泡坏夕匕C全 }}1.125士 0.3770.0()()士0.000D全日 2.833士0.246*2.000士0.522*E组 1.917士0.515*1.125士0.43;弓*F组 2.00()土 0.5220.917士0.195G乡日 2.167士 0.4920.417士。一95‘出血_和脂肪坏死 0.00()士0.0()() 1.250士0.54理* 1.542士0.838* 0.583士0.359「‘O一25士 0.226‘’炎症浸润 0.167士0.2161.:375士0.569* 0.958士0.620* 0.8:玉3士0.326’ 0.792士0.3:;4J总分 1.292士0.512 7.458士1.010木 5.542士 1.777* 4.333士0.889 3.500士0.769，’注:“*”与C组相比，P<0.01，“a”与D组相比，P<0.01，“b”与E组相比，P< 0.01。聂‘。·。。评分 8.00C组D组E组分组F组G组图2.6各组大鼠胰腺组织形态学总体评分

胰腺的腺泡细胞坏死、出血和脂肪坏死这两项上差异有统计学意义，水肿和炎症细胞浸润的减轻无明显差异，但组织形态学总体评分仍较E组明显降低。(见表2.2、图2.6、图2.7)表2.2胰腺组织形态学改变评分分fll水肿月泉泡坏夕匕C全 }}1.125士 0.3770.0()()士0.000D全日 2.833士0.246*2.000士0.522*E组 1.917士0.515*1.125士0.43;弓*F组 2.00()土 0.5220.917士0.195G乡日 2.167士 0.4920.417士。一95‘出血_和脂肪坏死 0.00()士0.0()() 1.250士0.54理* 1.542士0.838* 0.583士0.359「‘O一25士 0.226‘’炎症浸润 0.167士0.2161.:375士0.569* 0.958士0.620* 0.8:玉3士0.326’ 0.792士0.3:;4J总分 1.292士0.512 7.458士1.010木 5.542士 1.777* 4.333士0.889 3.500士0.769，’注:“*”与C组相比，P<0.01，“a”与D组相比，P<0.01，“b”与E组相比，P< 0.01。聂‘。·。。评分 8.00C组D组E组分组F组G组图2.6各组大鼠胰腺组织形态学总体评分

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 陈学清,姜泊,宋于刚,智发朝,巩兰波;早期生长反应因子-1和组织因子在大鼠胰腺炎组织中的表达[J];第一军医大学学报;2004年11期

2 程书榜,王成友,徐敏;温生理盐水持续腹腔灌洗预处理对大鼠急性胰腺炎的影响[J];肝胆外科杂志;2003年01期

3 肖卫民,蒋碧梅,石永忠,刘梅冬,唐道林,夏珂,王慷慨,张华莉,邓恭华,肖献忠;从凋亡信号通路探讨热休克蛋白保护过氧化氢所致心肌细胞凋亡的机制[J];中国动脉硬化杂志;2003年04期

本文编号：2785633