PXR激动剂在小鼠结肠炎中的作用及其与肠道RegⅢγ分泌的关系

发布时间：2020-08-15 17:31

【摘要】：研究背景炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种慢性肠道炎症性疾病。IBD病因和发病机制都未明确。孕烷X受体(Pregnane X receptor,PXR)是一种孤儿核受体,在肝脏、骨骼及肠道等处表达。PXR能通过调控肠道内炎性因子的分泌,在肠道炎症反应中发挥作用。胰再生源蛋白Ⅲγ(regenerating ganeⅢγ,RegⅢγ)是抗菌肽中一种,能够限制细菌入侵肠道。目前对于PXR具体的抑制炎症作用研究较少。目的通过PXR激动剂干预结肠炎模型小鼠,观察结肠组织学改变,检测其结肠中Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)及RegⅢγ的表达水平以及血清中髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的含量并与正常对照组比较。了解PXR在结肠炎中的作用,探讨研究PXR靶向治疗药物的临床价值。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠,共48只随机分为,12只/组。模型组给予葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)干预。(1)正常对照组:自由饮食,无特殊处理。(2)DSS结肠炎模型组:实验第4天开始,自由饮用2.5%DSS溶液7天。(3)PCN+DSS模型组:从实验第1天开始,按10mg/kg的量,将PCN溶于玉米油中配成100ul的溶液,给予灌胃,自由饮食。实验第4天改为自由饮用2.5%DSS溶液7天,同时继续给予PCN灌胃,方法及用量同前。(4)PCN对照组:给予PCN灌胃10天,量及方法同(3),自由饮水及饮食。观察各组小鼠一般状况,并收集相关数据,进行DAI评分。于第11天处死全部小鼠,收集血液及结肠组织。ELISA检测血清中TNF-a、MPO、IFN-γ。结肠组织HE染色后进行HI评分,免疫组化方法检测结肠组织内TLR4及RegⅢγ的表达,定量PCR检测MyD88以及RegⅢγ的mRNA在结肠的表达情况。数据用统计软件SPSS 21.0处理,计量资料用均数±标准差(x±s)描述。Levene检验方差齐性,单因素方差分析(ANOVA)法进行方差分析。组间比较采用LSD-t法。定性资料的差异性比较选用秩和检验。取α=0.05,P0.05时差异有统计学意义。结果(1)采用LSD-t检验法两两比较各组小鼠DAI评分,结果提示DSS模型组小鼠与正常组比较,DAI评分较高(P0.05)。PCN+DSS组小鼠DAI评分与DSS模型组小鼠比较差异无统计学意义(P0.05)。正常组小鼠的DAI评分与PCN组比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)将各组小鼠结肠组织HI评分进行两两比较,结果DSS模型组及DSS+PCN组的HI评分均比正常组高,均符合P0.05。DSS模型组与DSS+PCN组比较,前者较高,符合P0.05。(3)DSS模型组与DSS+PCN组小鼠血清MPO、TNF-α、IFN-γ的含量均比正常组高(P0.05)。与DSS模型组相比,DSS+PCN组血清TNF-α、IFN-γ浓度明显降低(P0.05)。(4)正常组的TLR4及RegⅢγ在肠粘膜组织中的表达明显低于DSS模型组(P0.05)。DSS模型组上述指标与DSS+PCN组比较均较高,满足P0.05。(5)比较各组小鼠结肠中MyD88以及RegⅢγ的mRNA表达量。正常对照组明显低于DSS模型组与DSS+PCN组(P0.05),DSS模型组高于DSS+PCN组(P0.05)。结论1.PXR激活剂可通过激活PXR受体,然后抑制TLR4/MyD88通路,减少RegⅢγ的释放。2.PXR的激活可以对结肠炎症反应起到保护作用。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R574.62
【图文】：

各组小鼠血清MPO、TNF-α及IFN-γ浓度比较

【参考文献】