组织肾素—血管紧张素系统在急性胰腺炎发病机制中的作用及络沙坦防治作用的实验研究

发布时间：2020-08-31 18:18

　　第一部分急性水肿型及急性坏死型胰腺炎大鼠模型的制作目的建立简便、易复制、重复性好的急性水肿型胰腺炎(AEP)和急性坏死型胰腺炎(ANP)模型,为实验的第二部分和第三部分提供实验动物。方法30只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、AEP组、ANP组,每组10只。AEP组腹腔注射雨蛙素,40ug/kg,共2次,第一次注射后12小时造模成功。ANP组腹腔注射精氨酸,2g/kg,共2次,第一次注射后24小时造模成功。正常对照组,给予同等剂量的生理盐水腹腔注射。各组大鼠于实验结束时检测血浆淀粉酶(AMY)、胰腺/体重比值以及胰腺组织病理学变化。结果AEP组和ANP组大鼠AMY均较对照组明显升高,ANP组升高更明显;胰腺/体重比值也显著升高,ANP组胰腺重量增加更明显,与AEP组比较也有显著增加;两组的胰腺组织病理检查显示,AEP组大鼠胰腺组织表现为明显水肿,胰腺叶间隔、小叶间隔间隙增大,炎性细胞浸润,腺泡水肿明显;ANP组大鼠胰腺叶间隔、小叶间隔间隙增大,炎性细胞浸润,腺泡水肿,部分坏死,小叶结构破坏,可见实质内出血。结论雨蛙素40ug/kg两次和精氨酸2g/kg两次腹腔注射,可以诱发大鼠AEP和ANP,此两种动物模型操作简便,容易复制,重复性好,模型形成迅速。第二部分组织肾素-血管紧张素系统在不同类型急性胰腺炎发病机制中的作用目的观察组织肾素-血管紧张素系统(RAS)在AEP和ANP中的变化,组织RAS与细胞因子TNF-α、IL-1β以及RAS与急性胰腺炎(AP)严重程度的关系,进一步阐明组织RAS在AP发病机制中的作用。方法30只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、AEP组、ANP组,每组10只。采用雨蛙素腹腔注射诱导AEP模型,精氨酸腹腔注射诱导ANP模型,各组于造模成功后处死大鼠,观察大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肾素、AMY、TNF-α、IL-1β水平变化,检测胰腺/体重比值、胰腺组织病理变化,血管紧张素原和AngⅡ受体AT1在胰腺组织内的免疫组化定位,RT-PCR法检测胰腺组织局部血管紧张素原、肾素及AngⅡ受体AT1mRNA水平。结果AEP组和ANP组大鼠血浆AMY、TNF-α、IL-1β、AngⅡ、肾素水平均明显升高,在ANP组中升高更明显,统计学上差异显著(p0.05)。AEP组和ANP组大鼠血管紧张素原、肾素、AT1 mRNA水平较对照组明显升高,ANP组较AEP组也略有升高。血浆AngⅡ水平与血浆TNF-α、IL-1β水平和胰腺组织病理评分有一定的相关性,血浆TNF-α、IL-1β水平和胰腺组织病理评分也有一定的相关性。血管紧张素原和AngⅡ受体AT1在胰腺组织内主要定位于胰腺血管壁和导管壁。结论在胰腺组织中存在自己独立的RAS系统,在AP发病时被激活,并进一步激活TNF-α、IL-1β,共同参与了AP的发病机制。第三部分络沙坦对急性坏死性胰腺炎及合并肺损伤的防治作用目的研究AngⅡ受体AT1拮抗剂络沙坦(Losartan)对ANP大鼠是否有保护作用。方法40只健康雄性SD大鼠随机分为4组,正常对照组、ANP组、Losartan预防组,Losartan治疗组。采用大剂量精氨酸腹腔注射诱导ANP模型,预防组于造模前90分钟给予Losartan 200ug/kg,两次,每次间隔1小时,治疗组于造模后30分钟给予Losartan 200ug/kg,两次,每次间隔1小时。各组于造模后24小时处死大鼠,观察大鼠血浆AngⅡ、肾素、AMY、TNF-α、IL-1β水平变化,检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、肺湿/干重比值、胰腺/体重比值、胰腺和肺组织病理变化,RT-PCR法检测胰腺组织血管紧张素原、肾素及AngⅡ受体AT1 mRNA的水平。结果ANP组AngⅡ、肾素、AMY、TNF-α、IL-1β、胰腺/体重比值、肺组织MPO、肺湿/干重比值均较对照组明显升高;胰腺组织血管紧张素原、肾素及受体AT1 mRNA的水平也较对照组升高,Losartan预防和治疗组血浆AMY、TNF-α、IL-1β、肺组织MPO、肺湿/干重比值、胰腺/体重比值较ANP组明显下降,胰腺和肺组织病理损伤明显减轻。血浆AngⅡ、肾素水平和胰腺组织血管紧张素原、肾素及AngⅡ受体AT1 mRNA的水平较ANP组变化不明显。结论Losartan对血浆AngⅡ、肾素水平及胰腺组织血管紧张素原、肾素及受体AT1 mRNA水平无明显影响,可以减少TNF-α、IL-1β的产生,对ANP及合并的肺损伤具有保护作用。
【学位单位】：苏州大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2007
【中图分类】：R576
【部分图文】：

胰腺,病理,积液,水肿

三、各组大鼠组织病理学表现大体病理变化：AEP组大鼠可见腹腔少量积液，胰腺明显水肿。ANP组大鼠可见腹腔内较多积液，胰腺明显水肿，散在出血斑，可见局部皂化斑，见图3.1～3.3。图3.1 正常对照组胰腺大体病理图3.2 AEP组大鼠胰腺大体病理表现

胰腺,积液,水肿,大鼠

ANP组 10 9.33±1.76*p<0.01 *与AEP组比 p<0.05对照组AEP组ANP组10.008.006.004.002.000.00图2 三组大鼠胰腺/体重比值(g/kg)三、各组大鼠组织病理学表现大体病理变化：AEP组大鼠可见腹腔少量积液，胰腺明显水肿。ANP组大鼠可见腹腔内较多积液，胰腺明显水肿，散在出血斑，可见局部皂化斑，见图3.1～3.3。

组织病理,水肿,组织表,腺泡

图3.3 ANP组大鼠胰腺大体病理表现AEP组大鼠胰腺组织表现为明显水肿, 胰腺润，腺泡水肿明显。ANP组大鼠胰腺叶间隔泡水肿，部分坏死，小叶结构破坏，可见实大鼠胰腺组织病理评分有显著性差异。见表表4. 三组大鼠胰腺组织病理评分鼠数(只) 10 10 10 00

【参考文献】