瘦素促进大鼠肝星状细胞（HSC-T6）的增殖及SB-431542干预的研究

发布时间：2020-10-01 17:01

　　 目的：1．观察瘦素经转化生长因子p1(TGF-p1)途径促进sD大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖。 2．观察TGF-B1受体特异性拮抗剂sB-431542抑制外源性瘦素对肝星状细胞的增殖。 方法：试验分为对照组、不同浓度的瘦素(50、100、和300rig/m1)组及不同浓度的SB-431542(0．5、1．0、10．Oumol/m1)作用于瘦素lOOng/ml诱导的HSC-T6细胞组，分别作用于肝星状细胞不同时间(24h、48h、72h)组，应用MTT法检测瘦素对肝星状细胞的增殖作用；采用RT—PCR法检测肝纤维化指标aI型前胶原a1(ColIal)mRNA和肝星状细胞活化指标a-平滑肌肌动蛋A(a-SMA)mRNA的变化；用间接免疫荧光来观察aI型前胶原al(ColIal)蛋白、a-平滑肌肌动蛋A(a-SMA)蛋白的表达；用放射免疫来测定肝纤维化指标III型胶原(PCIII)，层粘连蛋白(LN)的表达。 结果：1．MTT结果显示瘦素可以促进肝星状细胞增殖，并存在剂量和时间依赖关系，以瘦素lOOng/ml，48h时的最明显，增殖率为81．3％；2．瘦素组与对照组相比，al(ColIal)mRNA、a-SMAmRNA、al(ColIal)蛋白、a-SMA蛋白、PCIII、LN的表达呈递增趋势，差异有统计学意义（P0．05)，并存在剂量、时间依赖性，以瘦素lOOng/ml，48h时最明显；3．不同浓度sB-431542干予页瘦素诱导HSC—T6组与瘦素100rig/m1组相比，al(ColIal)mRNA、a—SMAmRNA、al(ColIal)蛋白、a-SMA蛋白、PCIII、LN的表达随浓度的增加，时间的延长呈递减的趋势，各指标之间的差异有统计学意（P0．05)，并以10．0umol/ml，48小时为最明显。 结论：1、瘦素可以促进肝星状细胞的增殖，有剂量、时间依赖性。 2、SB-431542可明显抑制外源性瘦素对肝星状细胞的增殖作用，有剂量、时间依赖性，故运用sB 431542可能对防治肝纤维化有效，为防治肝纤维化提供新思路。
【学位单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R575.2
【文章目录】：
—、主要缩略语及英文索引
二、中文摘要
三、英文摘要
四、论文正文
    前言
    主要实验材料及仪器
    方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
五、综述
    参考文献
六、硕士期间发表的论文
七、致谢

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