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大鼠急性胰腺炎模型的建立及不同压力高压氧治疗效果的实验研究

发布时间:2020-10-16 05:08
   重症急性胰腺炎是目前临床上最难治疗的疾病之一,发病率高、预后差、死亡率高,有报道可高达30%-40%,花费巨大。临床上发病原因有胆道疾病、高脂血症、饮食、代谢性疾病等多种因素,国内以胆源性胰腺炎为主。治疗方法也从原来的手术治疗为主发展到内科保守治疗和外科手术并行,通常需要多学科合作。对于急性胰腺炎发病机理的研究,近年来,尽管已取得了长足的进步,先后提出了“胰酶消化学说、微循环障碍学说”等学说,并针对其机理进行了深入的治疗探索和研究,但临床治疗效果仍不令人满意。目前认为单核巨噬细胞、中性粒细胞及胰腺腺泡细胞等激活产生的细胞因子导致了炎症反应综合征的发生,加重了急性胰腺炎对机体各器官的损害,特别是肺、肝、肾等机体重要器官的损伤而导致全身多器官功能不全(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)或衰竭(multiple organ failure,MOF)的发生、发展,严重影响重症急性胰腺炎预后。因此如果能成功制造急性胰腺炎模型,深入研究重症急性胰腺炎的发病机制,探究炎症介质和细胞因子的产生和释放,将对重症急性胰腺炎的临床治疗有重大意义。急性胰腺炎模型的建立应该具备以下特点:操作相对简单,重复性好,胰腺炎严重程度的可控制性,与人类胰腺炎有形态学和病理生理过程的相似性。由于重症急性胰腺炎病人早期大量液体渗出,导致有效循环容量不足,胰腺供血下降,微循环障碍,胰腺缺血缺氧,加剧胰腺坏死,同时由于大量炎症介质释放,严重腹胀等,病程早期即出现急性呼吸窘迫综合征,加重缺氧,难以满足机体的器官组织对氧的需求,导致MODS或MOF发生。高压氧治疗或许可解决这一临床难题。因此本实验采用结扎胰管造成胰管梗阻,模仿胆源性胰腺炎的病理生理过程,并采用高压氧分压力梯度进行干预治疗,对临床治疗具有较大的参考价值。 目的:探讨大鼠急性胰腺炎模型的建立及采用不同压力梯度的高压氧作为治疗措施对急性胰腺炎的影响。 方法:48只SD雌性大鼠按随机的方法分组,其中16只为对照组,分为2个亚组,每亚组为8只,治疗组为24只,分为3个亚组,每亚组为8只,假手术组8只大鼠。对照组和治疗组造模采用胰管结扎的方法制备胰腺炎模型,然后采用不同高压氧压力梯度治疗的方法,分别在造模后的第一天,第七天处死,留取胰腺标本及血液进行分析。假手术组仅进行切开腹壁后缝合。 结果:造模后第一天胰腺淀粉酶水平在假手术组为798.50±113.5IU/L,对照组为3156.2±639.9IU/L。假手术组与对照组之间有统计学差异。七天的不同高压氧压力梯度治疗之后,在各炎症细胞因子方面,各高压氧治疗组与对照组间均存在显著差异(P=0.000,P0.05),其中IL-2组、IL-6及IL-10组中,各高压氧压力梯度之间均存在显著差异(P0.05),在TNF-a组中白1.5-2.0Mpa组之间和1.5-2.5Mpa之间均存在显著差异(P0.05),而2.0-2.5Mpa组之间无显著差异(P=0.085, P0.05)。在胰腺病理及电镜图片显示0.25Mpa改善最明显。 结论:高压氧治疗组可以显著的减少大鼠胰腺腺泡的坏死和出血,同时高压氧治疗可以显著抑制血液炎症因子的活性。
【学位单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2011
【中图分类】:R576
【部分图文】:

胰管,结构图,大鼠,亚组


每亚组为 8 只,进行不同压力梯度的高压氧治疗。对照组为 B 组,16 只大鼠随机分为 B1、B2 两个亚组,每亚组 8 只,A、B 两组均进行结扎造模。假手术组 8 只大鼠仅进行开腹关腹后缝合手术。1.2.2 建立大鼠急性胰腺炎模型术前所有实验大鼠均禁食水 12 小时,按照称重后每 100g 体重给予水合氯醛0.3ml 的剂量进行腹腔注射麻醉。注射后注意观察大鼠角膜反射和四肢肌力。待大鼠出现角膜反射消失、四肢软瘫即判断为已进入完全麻醉状态。手术开始后,手术野常规消毒铺巾,取大鼠剑突下 1-2cm 腹部正中切口,切口周围毛发进行备皮切口长约 3-4cm。依次切开皮肤,皮下组织及腹壁肌层,打开腹腔后辨认胃,十二指肠及脾脏,小心去除十二指肠及脾脏间粘膜后向上翻开胃部其下粉红色组织即为胰腺(见图 1),辨认胰管开口于十二指肠的位置,以 0 号黑丝线结扎(见图 2)采用心脏注射器穿刺直接采血法采血,使用生化分析仪测定血淀粉酶水平。

高压氧,密闭容器,进气管,排气管


A1、A2、A3 组大鼠当天开始行高压氧治疗 7 次,每次 1 小时。用空气加压舱,治疗时将大鼠置于密闭消毒水并润湿大鼠。(图 3)容器的进氧管接舱内的直流式排氧口。加压 20 min,治疗压力分次a。稳压后先将进/排氧流量调节器均开至 10之后,进/排氧流量调节器均开至 300L/h 进行每次治疗时间为 1 小时,大鼠均每日接受高压进行高压氧干预治疗。

高压氧,面板,内压力,压力


容器内加少量无菌注射用水并润湿大鼠。(图 3)容器的进氧管接舱内的直流式供氧口(图4),排氧管接舱内的直流式排氧口。加压 20 min,治疗压力分次分别调至 0.15Mpa、0.20Mpa、0.25Mpa。稳压后先将进/排氧流量调节器均开至 1000L/h,用 100% O2进行洗舱 3 分钟,之后,进/排氧流量调节器均开至 300L/h 进行治疗,60min 后减压,减压 25min。每次治疗时间为 1 小时,大鼠均每日接受高压氧治疗。对照组仅进行胰管结扎但不进行高压氧干预治疗。图 3:特制高压氧密闭容器(白色为进气管
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