抑瘤素M在DSS诱导小鼠结肠炎中的作用

发布时间：2020-10-22 22:17

　　 研究背景炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是病因尚不明确的慢性非特异性炎症性疾病,包括克罗恩病(Crohn's disease,CD)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)。近年来在亚洲特别是中国的发病率逐渐增高,众多证据表明肠道屏障功能在IBD中起重要的作用,抑瘤素M(Oncostatin M,OSM)可增加细胞增殖,修复肠道上皮,并且PGE2可诱导OSM的产生。然而OSM在IBD中的作用,及选择性COX-2抑制剂是否可调节OSM的表达并且影响结肠炎的严重程度值得进一步的研究。目的建立IBD动物模型,应用选择性COX-2抑制剂塞来昔布对其进行干预,检测血清中TNF-α、IFN-γ的水平,行疾病活动指数及组织学损伤指数评分评价疾病炎症程度,检测小鼠结肠组织中OSM、COX-2、STAT3和pSTAT3在蛋白水平的表达。探究选择性COX-2抑制剂对OSM的调节及OSM在结肠炎中的作用。方法SPF级,6-8周雄性C57BL/6小鼠48只,随机分为4组。(1)正常对照组:自由进食水,不进行干预。(2)DSS模型组:自由饮用2.5%DSS溶液,共8天,按每只小鼠每天需要5ml的饮水量来配制,每两日更换一次DSS溶液,自由进食。(3)DSS+塞来昔布组:在自由饮用2.5%DSS溶液基础上,于第3天开始给予塞来昔布(Celecoxib)15mg/kg/d灌胃。(4)塞来昔布组:自由进食水,于实验开始第3天给予塞来昔布15mg/kg/d灌胃。每只小鼠每日监测体重变化,观察小鼠大便性状及是否大便带血,进行疾病活动度(disease activity index,DAI)评分,于第8天脱颈处死,眼球取血法取血行ELISA检测TNF-α、IFN-γ水平,取结肠组织做HE染色行组织学损伤指数(Histological index,HI)评分;免疫组织化学法检测结肠组织中OSM、COX-2的表达;Western Blot检测肠道组织中OSM、COX-2、STAT3及pSTAT3蛋白的表达。实验结果用SPSS 22.0统计学软件分析,数据使用均数±标准差描述,所有数据进行方差齐性分析(Levene),多组数据采用单因素方差分析(ANOVA),方差分析有意义者进行两两比较(Bonferroni),P0.05表示差异有统计学意义。结果各组小鼠结肠炎DAI评分:与正常对照组相比,DSS模型组出现体重下降,腹泻及血便。DSS+塞来昔布组症状较DSS模型组重。DSS模型组高于正常对照组(P0.05),DSS+塞来昔布组高于DSS模型组(P0.05)。塞来昔布组与正常对照组无明显差异。各组HI评分:与正常对照组相比,DSS模型组结肠粘膜充血水肿,上皮细胞损伤、溃疡,腺体结构不同程度的消失,隐窝变形、破坏,炎性细胞浸润。DSS+塞来昔布组镜下表现较DSS模型组更重。DSS模型组高于正常对照组(P0.05),DSS+塞来昔布组高于DSS模型组(P0.05)。塞来昔布组与正常对照组无明显差异。ELISA检测各组血清中TNF-α、IFN-γ的表达:DSS模型组高于正常对照组(P0.05),DSS+塞来昔布组高于DSS模型组(P0.05),塞来昔布组与正常对照组无差异(P0.05)。免疫组织化学检测肠道组织中OSM、COX-2的表达:DSS模型组高于正常对照组(P0.05),DSS+塞来昔布组低于DSS模型组(P0.05),塞来昔布组与正常对照组无差异。Western Blot检测肠道组织OSM、COX-2、STAT3和pSTAT3的表达:DSS模型组高于正常对照组(P0.05),DSS+塞来昔布组低于DSS模型组(P0.05),塞来昔布组与正常对照组无差异。结论1.6-8周雄性C57BL/6小鼠给予2.5%DSS溶液可诱导出结肠炎。2.选择性COX-2抑制剂塞来昔布可抑制结肠组织中OSM的表达,下调STAT3及pSTAT3,加重DSS诱导的结肠炎。3.OSM参与了DSS诱导的小鼠结肠炎的发病过程。
【学位单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R574.62
【部分图文】：

各组DAI评分

各组小鼠结肠组织病理改变（HE×200）

各组HI评分注：*：与正常对照组相比，P＜0.05；#：与DSS模型组相比，P＜0.05
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 农辉;黄雪;;葡聚糖硫酸钠诱导结肠炎模型的研究进展[J];世界华人消化杂志;2014年22期

2 温红珠;郝微微;李佳;唐志鹏;;葡聚糖硫酸钠结肠炎模型影响因素的研究进展[J];世界华人消化杂志;2011年36期

3 安晓霞;崔玉芳;李燕;董波;孙淑华;莘旭妮;柳晓兰;毛建平;刘萍;;复合法诱发小鼠结肠炎模型的建立和免疫学验证[J];感染.炎症.修复;2008年01期

4 望运玲;岳源;武双婵;丁虹;;法舒地尔对结肠炎模型大鼠的治疗作用[J];医药导报;2015年05期

5 张敏;于成功;;普拉梭菌及其上清液对葡聚糖酸钠诱导的结肠炎小鼠Treg/Th17平衡的影响[J];胃肠病学和肝病学杂志;2017年12期

6 王霞;陈烨;王显飞;何雅婧;朱疆依;宋于刚;;Syndecan-1在小鼠结肠炎模型中的表达和意义[J];胃肠病学;2008年06期

7 台卫平,罗和生;大鼠离体结肠炎模型的制作[J];中国病理生理杂志;2002年02期

8 王学伟;杨净慧;曹勤;唐剑敏;;BALB/c小鼠噁唑酮结肠炎模型的建立[J];中国临床医学;2011年06期

9 李娇;陈永文;张庆镐;;CD1d基因敲除小鼠拮抗DSS诱导结肠炎[J];免疫学杂志;2018年09期

10 赖衍宗;章颖;杨宏升;屈霄;于成功;;丁酸钠对TNBS结肠炎模型大鼠肠黏膜修复的影响[J];胃肠病学;2011年07期

相关博士学位论文 前7条

1 陈玮;CAI对DSS诱导的小鼠结肠炎之治疗作用及其机理研究[D];北京协和医学院;2017年

2 袁学勤;肠泰、四神及香连方防治小鼠实验性结肠炎的效用机理研究[D];北京中医药大学;2005年

3 胡仁伟;Th细胞、B7分子在DSS小鼠结肠炎发病中的作用研究[D];中国协和医科大学;2001年

4 陈曦;Toll样受体4与β防御素2在结肠炎上皮表达及调控的研究[D];四川大学;2005年

5 马勇政;NDRG2在结肠炎以及结肠炎诱导的结肠癌变过程中的功能和机制研究[D];第四军医大学;2017年

6 陈焰;大鼠化学诱导性结肠炎模型的建立及云母干预治疗机制探讨[D];浙江大学;2008年

7 许晓希;子宫内膜再生细胞调控B淋巴细胞治疗小鼠溃疡性结肠炎的作用机理研究[D];天津医科大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 秦晓霞;干扰素诱导蛋白204在小鼠DSS诱发结肠炎中的作用[D];吉林大学;2018年

2 张目涵;抑瘤素M在DSS诱导小鼠结肠炎中的作用[D];郑州大学;2018年

3 路瑶;PXR激动剂在小鼠结肠炎中的作用及其与肠道RegⅢγ分泌的关系[D];郑州大学;2018年

4 胡庆;粪菌移植及粪菌移植联合果胶治疗对DSS诱导结肠炎小鼠的影响及其机制研究[D];西南医科大学;2018年

5 郭丽芳;DDR1a在小鼠实验性结肠炎中的作用及机制[D];兰州大学;2018年

6 刘科伟;E3泛素连接酶TRIM21在结肠炎以及结肠癌中的作用与机制[D];华东师范大学;2017年

7 贾立伟;牛磺熊去氧胆酸联合柳氮磺胺吡啶对小鼠结肠炎模型的药效作用及机制[D];第二军医大学;2016年

8 许欣;溃克灵及其改方对结肠炎模型大鼠肠道运动和胃肠激素的影响[D];南京中医药大学;2012年

9 缴莹;S100A4通过增加柠檬酸杆菌对肠上皮细胞的黏附促进结肠炎的发展[D];东北师范大学;2017年

10 曹霞;中药溃克灵对TNBS结肠炎模型大鼠TGF-β1表达的影响[D];南京中医药大学;2011年

本文编号：2852158