DJ-1在溃疡性结肠炎发生发展中的作用

发布时间：2021-02-18 13:27

　　背景:溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）是累及结肠和直肠黏膜的慢性非特异性炎症性疾病,近年来,我国人群发病率呈现出明显的增长。但UC的病因与发病机制至今仍不明确。本研究拟通过相关实验方法,来探索DJ1在UC发生发展中的作用以及DJ1是否通过P53实现相关调控。方法:体外采用不同细胞系构建UC炎症模型、凋亡模型及共培养屏障模型;体内选取DJ1基因敲除小鼠及野生型小鼠,分别采用正常饮食、DSS处理构建急性肠炎模型。通过小干扰RNA、重组腺病毒技术并结合DJ1基因敲除（DJ1 KO）小鼠,利用qRT-PCR、WB、免疫组化、流式细胞仪等分子生物学手段观察DJ1对结肠炎症、凋亡、细胞损伤及肠道粘膜屏障功能的影响。进一步分析DJ1对P53的调控作用及对结肠上皮细胞炎症及凋亡的影响。结果:DJ1在Caco2构建的细胞炎症模型和DSS构建的急性肠炎模型中表达显著下降（mRNA:1.015 VS 0.840,p<0.05;mRNA:NC=1.062 VS 3.5%DSS=0.540 VS 4%DSS=0.303,P<0.05）,同时在人体UC结肠粘膜中的表达也明显减... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１：?ＭＩＸ刺激Ｃａｃｏ－２细胞模拟结肠上皮细胞炎症环境??（Ａ）?ＴＮＦ－ａ；?（Ｂ）?ＩＬ－１?Ｐ?；?ＣＣ）?ＩＣＡＭ；?（Ｄ）ＩＬ８??（注：＊Ｐ＜０．?０５，?＊＊Ｐ?＜０．０１，?＊＊＊Ｐ?＜０＿?００１，?＊＊＊＊Ｐ〈０．０００１）??

ＩＬ－８的ｍＲＮＡ表达均显著上调（图１）；采用ＴＮＦ－ａ刺激ＨＣＴ１１６细胞模拟结肠??上皮细胞调亡模型，ＴＮＦ－ａ处理组与对照组相比，介导调亡的活化ｃａｓｐａｓｅ３表达显??著上调（图２）；采用Ｃａｃｏ－２及ＲＡＷ２６４．７共培养构建的肠黏膜屏障模型，可见??随着培养天数增加，跨膜电阻ＴＥＥＲ不断升高，培养至２１ｄ时已经达到８００Ｑ／ｃｍ２??以上，屏障建立完全，符合进一步实验要求（图３）。??Ａ?ＴＮＦ－ａ?ｇ?ＩＬ１ｐ??！：［ｂ１??Ｃ?ＩＣＡＭ?Ｑ?ＩＬ８??Ｍ１?￣?勹?，…?，??Ｉ４０－?＇?，?１３．??丨?Ｌｌ?ＬＩ??，?參?＜ｆ?＾??图１：?ＭＩＸ刺激Ｃａｃｏ－２细胞模拟结肠上皮细胞炎症环境??（Ａ）?ＴＮＦ－ａ；?（Ｂ）?ＩＬ－１?Ｐ?；?ＣＣ）?ＩＣＡＭ；?（Ｄ）ＩＬ８??（注：＊Ｐ＜０．?０５，?＊＊Ｐ?＜０．０１，?＊＊＊Ｐ?＜０＿?００１，?＊＊＊＊Ｐ〈０．０００１）??

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【参考文献】：
期刊论文
[1]云南省2679例炎症性肠病住院患者初步分析[J]. 唐源,李红纳,张延涛,李方,贺鹏美,王凤纤,赵黎东,李萍,朱立娜,缪应雷.  中华消化杂志. 2015 (06)
[2]Epidemiology and gene markers of ulcerative colitis in the Chinese[J]. Jun Yun,Department of General Surgery,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shaanxi Province,China Chang-Tai Xu,Bo-Rong Pan,Editorial Department,Journal of Fourth Military Medical University,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shaanxi Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(07)



本文编号：3039620