表达HBVX基因小鼠模型的建立及其对肝细胞凋亡因子的影响
发布时间：2021-10-16 04:40
目的:探讨HBVX基因及其产物对肝细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:将实验用SPF级成年雄性KM小鼠分为实验组、空质粒对照组、生理盐水对照组,实验组以构建好的PCDNA3.1-HBVX质粒,空质粒对照组以PCDNA3.1质粒,生理盐水对照组以生理盐水,通过尾静脉高压注入动物体内,在第48h处死取动物肝组织,以RT-PCR,凝胶回收测序及Westernblot检测HBVX表达,以RT-PCR半定量检测动物肝组织内Bax,bcl-2及c-myc的表达情况。结果:实验组小鼠RT-PCR显示465bp处有清楚条带,肝组织内有HBVX mRNA的存在,对照组无HBVX mRNA存在,Westernblot检测有HBVX蛋白的表达;对照组小鼠则无HBVX蛋白表达。通过对小鼠肝组织凋亡相关因子的半定量RT-PCR,相对于空质粒对照组和生理盐水对照组,转染HBVX基因的小鼠肝组织Bax（1.3127±0.0900vs1.0023±0.1670 P<0.05, 1.3127±0.0900vs0.9094±0.1081 P<0.05）、c-myc（1.6294±0.0672vs1.2869±0...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基因RTPCR结果
图 2 X 基因胶回收测序结果(从第 222 碱基到第 686 碱基为 X 基因序列在 NCBI 网上进行同源序列分析，结果如下：>gb|GQ924634.1| Hepatitis B virus isolate M57, complete genomeLength=3215Score = 843 bits (456), Expect = 0.0Identities = 462/465 (99%), Gaps = 0/465 (0%)Strand=Plus/PlusQuery 1 ATGGCTGCTAGGCTGTGCTGCCAACTGGATCCTGCGCGGGACGTCCTTTGTTTACGTCCC 60||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||Sbjct 1374 ATGGCTGCTAGGCTGTGCTGCCAACTGGATCCTGCGCGGGACGTCCTTTGTTTACGTCCC 1433
1.Bax 基因 mRNA 相对表达量的变化：转染表达量较转染空质粒对照组（1.3127±0.照组（1.3127±0.0900vs0.9094±0.1081 P5） 说明 HBVX 能上调 Bax 的表达。2.c-myc 基因 mRNA 相对表达量的变化：转表达量较转染空质粒对照组（1.6294±0.照组（1.6294±0.0672vs0.9757±0.0397 P6） 说明 HBVX 能上调 c-myc 的表达。3.Bcl-2 基因 mRNA 相对表达量的变化：转对表达量较转染空质粒对照组（1.5567±0.组（1.5567±0.1257vs0.5488±0.1278 P<0.0说明 HBVX 能上调 Bcl-2 的表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]HBx对肝细胞凋亡的双向调控及机制[J]. 张生君,王小众. 世界华人消化杂志. 2004(10)
[2]乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染[J]. 陈红英,唐南洪,张生君,陈治新,王小众. 世界华人消化杂志. 2004(03)
[3]Expression of nuclear factor-KB in hepatocellular carcinoma and its relation with the X protein of hepatitis B virus[J]. Shuang Ping Guo~1 Wen Liang Wang~1 Yu Qiang Zhai~2 Yi Ling Zhao~1 ~1Department of Pathology,Xijing Hospital of the Fourth Military Medical University,Xi’an,China ~2Department of Urology,the Central Hospital of Xi’an,China. World Journal of Gastroenterology. 2001(03)
[4]人乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立[J]. 屠亚军,琦祖和,杨鹏,潘燕,于树玉,杜淼,李光三. 中国医学科学院学报. 2000(03)
[5]乙肝病毒X基因与肝癌[J]. 王小众,陶其敏. 世界华人消化杂志. 1999(12)
[6]HBV X PROTEIN（HBX） INTERACTS WITH GENERAL TRANSCRIPTION FACTOR TFIIB BOTH INVITRO AND IN VIVO[J]. 杨益大,马亦林,郑临,陈亚岗,马伟杭,村上清史. Chinese Medical Sciences Journal. 1999(03)
本文编号：3439166
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基因RTPCR结果
图 2 X 基因胶回收测序结果(从第 222 碱基到第 686 碱基为 X 基因序列在 NCBI 网上进行同源序列分析，结果如下：>gb|GQ924634.1| Hepatitis B virus isolate M57, complete genomeLength=3215Score = 843 bits (456), Expect = 0.0Identities = 462/465 (99%), Gaps = 0/465 (0%)Strand=Plus/PlusQuery 1 ATGGCTGCTAGGCTGTGCTGCCAACTGGATCCTGCGCGGGACGTCCTTTGTTTACGTCCC 60||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||Sbjct 1374 ATGGCTGCTAGGCTGTGCTGCCAACTGGATCCTGCGCGGGACGTCCTTTGTTTACGTCCC 1433
1.Bax 基因 mRNA 相对表达量的变化：转染表达量较转染空质粒对照组（1.3127±0.照组（1.3127±0.0900vs0.9094±0.1081 P5） 说明 HBVX 能上调 Bax 的表达。2.c-myc 基因 mRNA 相对表达量的变化：转表达量较转染空质粒对照组（1.6294±0.照组（1.6294±0.0672vs0.9757±0.0397 P6） 说明 HBVX 能上调 c-myc 的表达。3.Bcl-2 基因 mRNA 相对表达量的变化：转对表达量较转染空质粒对照组（1.5567±0.组（1.5567±0.1257vs0.5488±0.1278 P<0.0说明 HBVX 能上调 Bcl-2 的表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]HBx对肝细胞凋亡的双向调控及机制[J]. 张生君,王小众. 世界华人消化杂志. 2004(10)
[2]乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染[J]. 陈红英,唐南洪,张生君,陈治新,王小众. 世界华人消化杂志. 2004(03)
[3]Expression of nuclear factor-KB in hepatocellular carcinoma and its relation with the X protein of hepatitis B virus[J]. Shuang Ping Guo~1 Wen Liang Wang~1 Yu Qiang Zhai~2 Yi Ling Zhao~1 ~1Department of Pathology,Xijing Hospital of the Fourth Military Medical University,Xi’an,China ~2Department of Urology,the Central Hospital of Xi’an,China. World Journal of Gastroenterology. 2001(03)
[4]人乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立[J]. 屠亚军,琦祖和,杨鹏,潘燕,于树玉,杜淼,李光三. 中国医学科学院学报. 2000(03)
[5]乙肝病毒X基因与肝癌[J]. 王小众,陶其敏. 世界华人消化杂志. 1999(12)
[6]HBV X PROTEIN（HBX） INTERACTS WITH GENERAL TRANSCRIPTION FACTOR TFIIB BOTH INVITRO AND IN VIVO[J]. 杨益大,马亦林,郑临,陈亚岗,马伟杭,村上清史. Chinese Medical Sciences Journal. 1999(03)
本文编号：3439166
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