DNA甲基化与MeCP2在大鼠肝纤维化中的作用及其分子作用机制研究

发布时间：2024-05-15 19:41

　　肝纤维化是多种慢性致病因素作用于肝脏引起ECM过量沉积的创伤愈合过程，激活的HSC是产生ECM的主要来源细胞。HSC活化是肝纤维化发生的中心环节。因此针对HSC的抗肝纤维化治疗成为治疗肝纤维化的关键步骤。目前针对肝纤维化的治疗主要集中于抑制HSC活化及胶原合成、促进胶原降解等几方面。目前研究发现DNA甲基化在HSC活化过程中具有重要作用。为了进一步探讨DNA甲基化在肝纤维化中的作用机制，我们应用5-杂氮-2-脱氧胞苷(5-aza-2-deoxycitydine,5-AzadC)作用于HSC，研究其对HSC活化增殖的影响及其分子机制，以揭示更多干预HSC活化的作用靶点。研究主要是从DNA甲基化这个角度进行，以重要的促HSC活化的细胞因子PDGF介导的信号转导通路为对象，以期为临床防治肝纤维化提供新方法、新思路。研究内容主要包括以下三个部分： 1. RASAL1在大鼠肝纤维化中的表达变化 CCl₄皮下注射建立大鼠肝纤维化模型，正常组10只、CCl₄处理组(3、6、9、12W)各15只。自处理之日开始，除正常组，其他各组雄性大鼠皮下注射50%CCl...

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文缩写词对照
中文摘要
ABSTRACT
1 前言
2 实验材料
    2.1 动物
    2.2 药品与试剂
    2.3 仪器与设备
    2.4 图象分析软件
3 实验方法
    3.1 动物的处理和模型的建立
    3.2 大鼠肝星状细胞的培养
    3.3 MTT 增殖实验
    3.4 肝组织病理学检测
    3.5 免疫组织化学检测
    3.6 BCA 法蛋白浓度测定
    3.7 流式细胞仪检测细胞周期（碘化丙啶染色法）
    3.8 组织及 HSC 总 RNA 提取（Trizol 法）
    3.9 RT-PCR 检测实验
    3.10 Western Blot 实验
    3.11 RNAi 干扰实验
    3.12 统计学分析
4 实验结果
    4.1 RASAL1 在大鼠肝纤维化中的表达变化
    4.2 RNAi 介导 MeCP2 基因沉默对 HSC-T6 细胞活化增殖的响
    4.3 大鼠肝纤维化形成中 MeCP2 对 RASAL1 表达的调控作用研究
5 讨论
结论
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3974129