不同HBV感染者外周血中特异性T淋巴细胞IL-21和IFN-γ表达水平的分析

发布时间：2017-05-26 17:09

  本文关键词：不同HBV感染者外周血中特异性T淋巴细胞IL-21和IFN-γ表达水平的分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：众所周知，乙型肝炎（Hepatitis B）是一种严重威胁人类健康的疾病。截止目前全球约有4亿慢性乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染者，且每年约有100万人死于HBV感染引起的诸如肝硬化、肝衰竭和原发性肝细胞癌等疾病。然而HBV感染慢性化的机理至今尚未阐明，这严重阻碍了该疾病的治疗。IL-21是一种由活化的CD4+T细胞和NKT细胞分泌的多功能细胞因子。近年研究发现，在慢性病毒感染过程中，IL-21能够促进CD8+T细胞的增殖并增强CD8+T细胞应答，在CD4+T细胞辅助CD8+T细胞控制病毒感染慢性化中起到重要作用。本研究通过检测不同HBV感染者外周血中特异性T淋巴细胞IL-21和IFN-γ的表达，从而阐述IL-21在HBV慢性感染者发病过程中的作用，为慢性乙型肝炎的治疗探寻新的方法。 目的： 探讨不同临床表现的乙型肝炎病毒感染者外周血中特异性IL-21+CD4+T细胞及IFN-γ+CD8+T细胞的差异及其与病毒学、血清学和生化学指标的关系，探讨其在乙型肝炎发病机制中的作用。 方法： 1.收集92例不同临床表现的HBV感染者（其中急性乙型肝炎18例，慢性HBV携带者18例，慢性乙型肝炎28例，非活动性HBsAg携带者28例）及13例健康人外周血，用密度梯度离心法进行单个核细胞（PBMC）分离；2.用HBV核心抗原肽库对每例患者PBMC进行刺激后，流式细胞术（FCM）检测特异性T淋巴细胞IL-21及IFN-γ的表达，同时设阴性对照（未刺激）和非特异性刺激（PMA+ionomycin刺激）；3.分析特异性IL-21+CD4+T细胞及IFN-γ+CD8+T细胞在不同临床表现的乙型肝炎病毒感染者之间的差异，同时分析它们之间的相关性及其与病毒学、血清学和生化学指标的关系。 结果： 1.在正常对照组、急性乙型肝炎组、HBV携带组、慢性乙型肝炎组和非活动性HBsAg携带组中，非特异性及HBV特异性IL-21+CD4+T细胞比例均高于阴性对照，差异有统计学意义。在正常对照组、急性乙型肝炎组、HBV携带组、慢性乙型肝炎组和非活动性HBsAg携带组中，非特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例均高于阴性对照和HBV特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例，差异有统计学意义。 2.非特异性IL-21+CD4+T细胞比例在急性乙型肝炎组(2.336±0.764%)中较正常对照组(0.563±0.435%)、 HBV携带组（0.328±0.181%）、慢性乙型肝炎组（0.469±0.217%）、非活动性HBsAg携带组（0.584±0.267%）显著升高，差异有统计学意义，P0.05；在正常对照组中非特异性IL-21+CD4+T细胞比例较HBV携带组、慢性乙型肝炎组、非活动性HBsAg携带组也有所升高，但差异未见统计学意义。非特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例在急性乙型肝炎组(29.43±18.6%)较正常对照组(9.08±4.54%)、HBV携带组（11.63±9.27%）、非活动性HBsAg携带组（15.96±17.35%）升高，差异有统计学意义，P0.05；急性乙型肝炎组较慢性乙型肝炎组也有所升高，但差异未见统计学意义；慢性乙型肝炎组（23.99±19.24%）较正常对照组和HBV携带组升高，差异有统计学意义，P0.05；慢性乙型肝炎组较非活动性HBsAg携带组也有所升高，但差异未见统计学意义。 3. HBV特异性IL-21+CD4+T细胞比例在急性乙型肝炎组(0.836±0.514%)较HBV携带组(0.302±0.197%)显著升高，差异有统计学意义，P0.05；在急性乙型肝炎组较正常对照组（0.639±0.376%）、慢性乙型肝炎组（0.674±0.741%）、非活动性HBsAg组（0.715±0.63%）也有所升高，，但差异未见统计学意义。HBV特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例在急性乙型肝炎组(3.271±2.686%)较正常对照组(2.334±2.07%)、HBV携带组（2.251±2.076%）、慢性乙型肝炎组（1.987±1.521%）、非活动性HBsAg携带组（2.608±2.964%）有所升高，非活动性HBsAg携带组较HBV携带组和慢性乙型肝炎组也有所升高，但是差异均未见统计学意义。 4.除慢性乙型肝炎组（r=0.008, P=0.966）外，病毒特异性IL-21+CD4+T细胞比例与IFN-γ+CD8+T细胞比例在正常对照组（r=0.657, P=0.015）、急性乙型肝炎组（r=0.503,p=0.034）、HBV携带组（r=0.793, P0.001）、非活动性HBsAg携带组（r=0.638, P=0.0003）组中均有较好的相关性。 5.急性乙型肝炎组及慢性乙型肝炎组中HBV特异性IL-21+CD4+T细胞比例和HBV特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例与其ALT、AST、HBV DNA、HBsAg、HBeAg定量之间均无相关性；HBV携带组中HBV特异性IL-21+CD4+T细胞比例和HBV特异性IFN-γ+CD8+T细胞比例与其HBV DNA、HBsAg、HBeAg定量之间均无相关性。 结论： 与急性乙型肝炎相比，HBV慢性感染者HBV特异性与非特异性IL-21+CD4+T细胞和IFN-γ+CD8+T细胞的比例明显低下或呈低下趋势，且IL-21+CD4+T细胞和IFN-γ+CD8+T细胞的比例基本呈现正相关，表明HBV慢性感染者T细胞功能低下，且IFN-γ+CD8+T细胞反应可能受到IL-21+CD4+Ｔ细胞的影响，值得进一步研究。
【关键词】：HBV IL-21 IFN-γ 病毒特异性T细胞
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R512.62
【目录】：

• 缩略语表4-7
• 中文摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-16
• 文献回顾16-29
• 1 材料29-31
• 1.1 仪器29
• 1.2 主要溶液29-30
• 1.3 主要试剂30
• 1.4 研究对象30-31
• 2 方法31-35
• 2.1 外周血 PBMC 的分离31-32
• 2.2 HBV 核心抗原肽库合成、溶解及储存32-34
• 2.3 流式细胞仪检测34-35
• 2.4 统计学处理35
• 3 结果35-45
• 3.1 研究对象一般临床资料比较35-36
• 3.2 外周血 IL-21+CD4+T 细胞和 IFN-γ+CD8+T 细胞流式细胞检测结果及分析36-45
• 4 讨论45-49
• 小结49-51
• 参考文献51-62
• 个人简历和研究成果62-63
• 致谢63

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 朱琳;陈韬;陆玉蕾;吴迪;罗小平;宁琴;;Contribution of IL-17 to Mouse Hepatitis Virus Strain 3-induced Acute Liver Failure[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2012年04期

2 丁艳荣;张野;连建奇;李新红;王临旭;黄长形;;IL-21在不同乙型肝炎病毒感染者外周血CD4~+T细胞中表达的初步研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年03期

3 赵明峰;邓琦;李玉明;林雪梅;刘鹏江;耿丽;李敬兰;;人源白细胞介素21对外周血及脐血来源CIK细胞产生和抗肿瘤活性的作用研究[J];中国免疫学杂志;2008年09期

  本文关键词：不同HBV感染者外周血中特异性T淋巴细胞IL-21和IFN-γ表达水平的分析，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：397514