棕榈酸增加FAT/CD36表达和棕榈酰化修饰致HepG2细胞内脂质异常积聚

发布时间：2024-12-03 22:20

　　目的：随着肥胖及其相关代谢综合征全球化的流行趋势,非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)在世界范围内成为最主要的肝脏疾病之一。脂肪酸转位酶(Fatty acid translocase, FAT/CD36)作为介导长链脂肪酸细胞摄取的膜糖蛋白,在FFA的跨膜转运中起重要作用。本课题旨在观察棕榈酸对HepG2细胞CD36表达和翻译后修饰的作用,并由此造成的对细胞脂质积聚产生的影响。方法：HepG2细胞用不同浓度的棕榈酸处理。用双荧光素酶报告基因检测CD36启动子活性；实时荧光定量PCR (real time polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫印迹(western blot)测定CD36 mRNA和蛋白水平；多聚核糖体分析测定蛋白翻译效率；荧光显微镜实时观测细胞脂肪酸摄入；油红O染色和游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)测定反映胞内脂质含量。将NC-siRNA和CD36-siRNA转入HepG2细胞中CD36的表达,比较CD36下调后对HepG2细胞内脂质积聚的影响。用定点突...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．３梅桐跋对ＦＡＴ／ＣＤ３６转录和翻译的影响？（ｍｅａｎ±ＳＤ（ｎ备３）．?＊：Ｐ＜０．０５?ｖｓ?ＰＡ＝０ｍＭ）??Ａ：?ＦＡＴ／ＣＤ３６雇动子活性测定；Ｂ：?ｍ民ＮＡ水平测定；Ｂ：?ＦＡＴ／ＣＤ：３６蛋白表达；Ｃ：多聚板??糖体分析ＦＡＴ／ＣＤ％蛋白翻译效率

重庆医科大学硕±研巧生学位论文???ＡＬ?Ｂ?？Ｎ??？?ｏ??０?色?Ａ?ｆ??Ｅ?皂?２．５－１?＊??〇?８－１?＊？?工?ｏｏｎ?？下??＾ｃ＾〇６?Ｔ?Ｔ?．ＳＳ?２．０－?Ｘ?ｉ??－當吝６．?Ｔ?Ｉ?ｉ２?？?１－５－?－１－?Ｔ?ｎ??８?罢名?４．?１．０．??....

图１．４掠桐酸对Ｈ巧Ｇ２细化内脂质积聚的巧响??Ａ：油紅?０?染色；Ｂ：细胞内?ＦＦＡ?的定量测定（ｍｅａｎ?±ＳＤ，ｎ＝４，＊：?Ｐ＜０．０５ｖｓ?Ｃｏｎｔｒｏｌ）；?Ｃ：巧光??显微镜动态观察ＦＦＡ摄取??

Ｈ巧Ｇ２细胞经ＯｍＭ或０．１６ｍＭ掠搁酸处理２４小时后，正胃显微镜观察油红??０染色结果发现；与对照组相比，掠搁酸处理的Ｈ巧Ｇ２细胞内橘红色颗粒增加，??提示肝细胞内脂质积聚增加（图１．４图Ａ）；同时用酶联免疫吸附巧验检测ＨｅｐＧ２??细胞内ＦＦＡ含量（阁１．４閔Ｂ），结果与油红....

图1.6CD36siRNA干扰对“epG2细胞内脂质积策的影响

ａ?ｃ?ｃ?２??ｇ?２１．０，?Ｉ??＾－１．０－?Ｉ?１?＊??５?０?？萬?Ｉ??＾?ｗ?０．５－?＊?ｃ?２?０．５－??１玄?Ｉ?玄鱼??泛星?ｏ．〇Ｊ￣ｌ￣，￣￣￣，￣￣Ｌ?（２?ｏ．ｏ＊ＬＩ＿，＿＿＿，＿＿Ｌ??ｇ?ＮＣ?ＣＤ３６ｓｉＲＮＡ?ＮＣ?ＣＤ３６?ＳｉＲＮ....

图２．２重组质粒ＰＯ－ＣＤ３６－ＡＡ－ＳＳ－Ｈｉｓ测序峰图??Ｆｉｇｕｒｅ２．?

?重庆医科大学硕壬研究生学位论文???合柱中的结合膜上。继续施Ｗ真空，至所有液体通过两个柱子；??（８）取下蓝色柱了，向白柱了中加入５ｍｌ去阳毒素洗液（Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ民ｅｍｏｖａｌ??Ｗａｓｈ），打开真空装置使液体流过柱子；??（９）加入２０ｍｌ纯化柱沈液（Ｃｏｌｕｍｎ?Ｗａ....

本文编号：4014233