HBV感染不同时期miRNA表达、HBV基因型、P基因点突变的研究

发布时间：2024-12-27 06:12

　　目的建立HBV感染者外周血单个核细胞（PBMC）microRNA（miRNA）的xMAP液态芯片的检测方法，并运用此技术研究HBV感染者不同时期miRNA表达变化及意义，用直接测序法检测HBV基因型及P区耐药突变位点与HBV感染不同时期的相关因素，探讨其在乙肝慢性化演变中的作用及其在诊断、治疗、判断预后中的应用价值。 方法第一部分建立基于xMAP液态芯片技术定量检测HBV感染不同时期PBMCmiRNA的方法，并用该法检测急性乙型肝炎（AHB，40例）、慢性乙型肝炎(CHB，53例)、乙肝后肝硬化(LC，44例）、原发性肝癌(HCC，32例）及正常健康对照组（NC，40例）标本PBMC中miR-191、-223、-222、-145、-21、-31、-126、-20a、-372的表达变化，分析其在乙肝慢性化演变中的作用。 第二部分采用直接测序法检测第一部分配对血清标本HBV基因型及HBV DNA P基因区耐药位点突变，对HBV感染后疾病转归的可能相关因素包括性别、年龄、HBV基因型、HBV DNA载量水平、HBeAg状态、miRNA表达水平作多因素Logistic回归分析，分析其在乙...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1液态芯片技术检测miRNA原理示意图

合探针-miRNA复合物结合，发出荧光而被检测。此种方法检测miRNA标本用量少，反应迅速，重复性好，无需逆转录和扩增，特异性好，并且可以多至100项检测指标灵活组合进行定性、定量分析。其原理如下图1-1所示。图1-1液态芯片技术检测miRNA原理示意图

图1-2TotalRNA电泳图A：AHB标本B：CHB标本，C：LC标本，D：HCC

TotalRNA电泳图A：AHB标本B：CHB标本，C：LC标本阴性对照。MAP液态芯片技术检测各组miRNA结果miR-223、miR-126染的不同时期有统计学差异，其他分子均无统计学差异，详细结1-5HBV感染不同时期PBMC中的miRNA....

图1-3miR126、-20a、-223在HBV感染者不同时期的表达

组（P=1.00）、CHB和LC组（P=0.11）之间外，其余各组间均有统计学差异（P<0.05），且随着慢性化进展miR-126表达下调；miR-20a除AHB和NC（P=1.00）及CHB（P=0.08）之间外，其余各组均有统计学差异（P<0.05），且随....

图2-1HBV感染者不同临床时期HBVDNAP基因区经PCR扩增产物电泳图像

1.5统计方法采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析，Kolmog检验法作数据正态分布检验，数据符合正态分布，计量资料以x±s表示采用单因素方差分析，多重比较采用Bonferroni法，计数资料采用χ2检感染后疾病转归的可能相关因素包括性别、年龄、HBV基因型....

本文编号：4021258