新疆地区乙型肝炎患者HBV基因型与耐药变异的相关性研究
本文关键词:新疆地区乙型肝炎患者HBV基因型与耐药变异的相关性研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:探讨新疆地区慢性乙型肝炎患者HBV基因分型及HBV-DNA水平与HBV耐药变异的关系。方法:收集200例慢性乙型肝炎患者的血清,采用PCR-荧光探针法检测其血清HBV-DNA量,应用实时荧光PCR技术,对其进行HBV基因分型。采用芯片法对其HBV拉米夫定及阿德福韦酯相关耐药突变位点(包括180位点、204位点、181位点、236位点)进行耐药检测。结果:(1)HBV基因型在不同性别及年龄间的分布无统计学差异(χ~2=1.818,,P=0.611;χ~2=18.406,P=0.080),而在不同民族间的分布差异有统计学意义(χ~2=89.588,P=0.000)。(2)HBV常见耐药位点的突变差异有统计学意义(P值均小于0.05)。(3)HBV的基因型不同,其耐药突变检出率不同(χ~2=33.348,P=0.000),其中C/D混合型的突变检出率达到96.7%。(4)HBV常见变异类型的基因型构成差异经统计学分析无意义(χ~2=16.193,P=0.369)。但C型HBV在各变异类型中所占的比例均最高。(5)乙型肝炎病毒的耐药突变率在不同HBV-DNA水平之间的差异有统计学意义(P值均小于0.05)。但在HBV-DNA中水平(105-107IU/ml)及高水平(≥107IU/ml)之间HBV突变检出率无统计学差异。结论:HBV基因型在不同民族间的分布不同;HBV常见耐药位点的突变情况不同;不同基因型的HBV有着不同的耐药突变率。HBV基因型在常见变异类型中的分布相同。乙肝病毒耐药变异与血清HBV-DNA水平有关,HBV-DNA水平高者,其HBV耐药突变率较高。而当HBV-DNA达到中等以上复制水平时,其耐药突变率与HBV-DNA量无关。
【关键词】:乙型肝炎病毒 耐药 突变 基因型
【学位授予单位】:新疆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R512.62
【目录】:
- 摘要8-9
- Abstract9-10
- 前言10-12
- 内容与方法12-24
- 1 研究对象12
- 2 仪器与试剂12-14
- 2.1 HBV-DNA 定量检测12-13
- 2.2 HBV 基因分型13
- 2.3 HBV 耐药基因检测13-14
- 3 样品收集与制备14
- 4 乙型肝炎病毒核酸定量检测14-15
- 4.1 标本及质控品处理14
- 4.2 PCR 扩增14-15
- 4.3 结果分析15
- 4.4 质量控制15
- 5 乙型肝炎病毒基因分型测定15-17
- 5.1 标本、对照品的核酸裂解处理15-16
- 5.2 试剂配制16
- 5.3 加样16
- 5.4 PCR 扩增16
- 5.5 基线和阈值设定16
- 5.6 质量控制16
- 5.7 试验结果的判断16-17
- 6 乙型肝炎病毒耐药检测17-23
- 6.1 样品 DNA 提取17-18
- 6.2 实验前准备18
- 6.3 PCR 扩增18-19
- 6.4 杂交19-20
- 6.5 芯片洗涤液的准备20
- 6.6 芯片的洗涤和干燥20
- 6.7 芯片扫描20
- 6.8 结果判读20-23
- 7 数据处理与统计学分析23
- 8 技术路线图23-24
- 结果24-29
- 讨论29-37
- 小结37-38
- 致谢38-39
- 参考文献39-43
- 综述43-53
- 参考文献49-53
- 攻读硕士学位期间发表的学位论文53-54
- 导师评阅表54
【参考文献】
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本文编号:438494
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