关于急性胰腺炎相关巨噬细胞对胃黏膜损伤与保护研究
本文关键词:关于急性胰腺炎相关巨噬细胞对胃黏膜损伤与保护研究
更多相关文章: 急性重症胰腺炎 胃黏膜损伤 巨噬细胞 TNF-α CD68
【摘要】:目的:探究胰腺炎引发的急性胃黏膜的损伤机制,以及含有氯磷酸盐的脂质体对急性重症胰腺炎(acute serous pancreatitis,SAP)相关胃粘膜损伤保护效应。方法:制备氯磷酸二钠脂质体和PBS缓冲液,保存备用。包裹氯磷酸二钠的脂质体使用紫外分光光度计测定浓度约6%。把脂质体溶解在4mL的灭菌(5mg/m L)缓冲液中,给大鼠注射之前确保悬浊液轻轻震荡混匀(使用剂量,20mg/kg)。取体重在350-385mg之间的S-D大鼠48只,随机分为对照组C组(PBS+脂质体)、P(PBS+脂质体)和T(氯磷酸盐+脂质体)组,每组2*8只,采胰腺包膜下注射牛磺胆酸钠(浓度为2%,2ml/kg)制备SAP大鼠模型。造模后2h、6h分别取血测定血浆肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α),同时取胰腺和胃粘膜组织;HE染色观察胰腺和胃黏膜组织形态学改变;免疫组织化学鉴定CD68在SAP胃黏膜中的表达;TUNEL染色检测胃组织细胞凋亡水平。结果:(1)SAP造模,2h后HE染色发现胰腺组织就呈现出明显的病理改变,6 h后炎症明显加剧,胃黏膜损害也随时间的增加呈进行性加重。P组TNF-α水平比C组明显升高(2h,145.13±11.50 vs23.2±2.03;6 h,245.06±12.11 vs30.28±6.07,P0.05),T组与P组相比明显降低(2h,93.24±23.11 vs 145.13±11.50;6h,135.18±13.10 vs245.06±12.11,P0.05)。(2)胰腺组织损伤病理得分中,T组比P组得分明显降低(2h,1.88±0.83vs4.13±0.83;6 h,2.87±0.64 vs 6.25±0.88,P0.01)。T组胃黏膜病理损伤得分比P组也是降低的(2 h,1.12±0.64 vs2±0.75;6 h,1.58±0.53 vs 3±1.31,P0.05)。(3)P组与C组相比,P组观察到CD68的表达,且注射氯磷酸二钠脂质体T组胃黏膜中CD68的表达水平升高。(4)注射氯磷酸二钠脂质体T组的胃黏膜的凋亡指数相对P组增高(2 h,15.7±0.92 vs11.5±1.64;6 h,21.12±1.06 vs12.6±2.44,P0.01)。结论:(1)急性胰腺炎相关巨噬细胞可以导致胃粘膜组织病理损。(2)氯磷酸二钠脂质体可以通过诱导巨噬细胞凋亡,对大鼠鼠重症急性胰腺炎相关胃黏膜损伤发挥保护效应。
【关键词】:急性重症胰腺炎 胃黏膜损伤 巨噬细胞 TNF-α CD68
【学位授予单位】:江苏大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R576
【目录】:
- 摘要5-7
- Abstract7-12
- 中英文对照表12-13
- 第一章 引言13-18
- 1、胰腺炎的炎症反应机制13-14
- 2、SAP相关细胞凋亡与凋亡的保护机制14-16
- 3、氯磷酸脂质体对SAP相关胃黏膜损伤的保护性作用可行性研究16
- 4、本论文研究的目的、方法、意义16-17
- 研究目的16-17
- 研究方法及技术17
- 研究意义17
- 5.实验方案的路线设计17-18
- 第二章 SAP大鼠胰腺、胃黏膜损伤及保护机制的研究18-39
- 2.1 实验材料18-22
- 试验试剂18
- 试验仪器18-19
- 试剂配制19-20
- 动物模型的制备20-21
- 标本的采集21-22
- 2.2 方法22-26
- 2.2.1 制作用于观察大鼠胰腺和胃粘膜病理学、形态学改变的组织切片22-23
- 2.2.2 ELISA试剂盒检测大鼠血清的TNF-α23-24
- 2.2.3 CD68试剂盒检测检测三组胃黏膜组织CD68的水平24
- 2.2.4 TUNEL染色检测胃黏膜细胞凋亡24-26
- 2.3、统计学分析26-27
- 2.4、试验结果27-33
- 2.4.1 胰腺组织病理结果27-28
- 2.4.2 胃黏膜组组织病理28-29
- 2.4.3 ELISA试剂盒检测大鼠血液中TNF-α 浓度的检测29-30
- 2.4.4 通过CD68间接检测胃黏膜巨噬细胞结果30-31
- 2.4.5 TUNEL染色试验检测胃黏膜细胞凋亡结果31-33
- 2.5 讨论33-39
- 胰腺损伤及全身炎症反应33
- SAP相关巨噬细胞的活化与调节机制33-34
- SAP血清中TNF产生及损伤机制34
- 胃黏膜相关损伤34-35
- 氯磷酸炎的对胰腺、胃的保护机制35-39
- 第三章 主要结论和展望39-41
- 主要结论39
- 展望39-41
- 参考文献41-45
- 综述45-64
- 一、胃黏膜损伤概括46-49
- 胃黏膜损伤原因46
- 胃粘膜损伤病理机制46-47
- 缺氧损伤病理机制47
- 化学损伤因素47
- 生物损伤因素47-49
- 二、SAP相关胃黏膜损伤49-54
- 细胞因子炎症介质对SAP相关胃黏膜的损伤作用49-52
- 氧自由基与损伤的关系52-53
- 缺血再灌注损伤53
- 应激与胃黏膜损伤的关系53-54
- 三、SAP相关胃黏膜损伤保护机制的研究54-57
- 胃黏膜保护机制研究54-55
- 细胞修复和再生条件与胃黏膜损伤修复关系55
- 微循环血量的维持对胃黏膜与粘膜保护的关系55-56
- 机体自由基清除与胃黏膜保护的关系56
- 机体内血管活性物质存在的量对粘膜完整性调节作用56-57
- 四、SAP相关胃黏膜损伤试验性、临床药物治疗进展57-59
- 临床治疗方法57-58
- SAP相关胃黏膜损伤保护的实验性研究以及部分治疗进展58-59
- 参考文献59-64
- 致谢64-65
- 在学期间发表的学术论文及其他科研成果65
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