运动疲劳通过调节胞内ROS影响心肌细胞自噬的研究

发布时间：2017-04-21 08:18

  本文关键词：运动疲劳通过调节胞内ROS影响心肌细胞自噬的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：自噬是广泛存在于生物体内的一种使长寿命蛋白质和相关细胞器降解再利用的分解代谢过程。一定程度正常生理水平下的自噬活动是一种细胞的内源性自我保护机制,同时参加很多适应性的免疫反应。当自噬过度或不足时,细胞则会出现稳态失调,加剧细胞损伤,严重时甚至会导致细胞死亡。已有的研究结果表明,病理环境下和来源于外界的刺激都会不同程度下增高心肌自噬活性,该过程与多种心脏疾病的发生和发展密切相关。我们实验室前期研究结果证实了,不同的运动量对心脏产生不同的调节作用。负荷内的水平较低运动训练能提高大鼠心脏功能,而当进行的运动是高强度超负荷时,大鼠则会产生运动疲劳严重损伤心脏功能。综上所述,我们认为细胞自噬的活动可能在运动疲劳引发的心肌损伤这个过程中扮演了重要角色。本实验的目的是探讨大鼠心肌细胞自噬水平在运动疲劳和训练时发生的变化及其分子机制。利用大鼠游泳训练方法制备模型后,采用冰冻切片HE染色及电镜法观察不同运动强度下大鼠的心脏形态及组织学结构。采用DCFH-DA探针法观察大鼠在不同运动强度下细胞内ROS水平。采用Western Blot法观察不同组间大鼠的心肌细胞中LC3及p62蛋白含量以确定其自噬水平。实验得到了如下结果,疲劳组大鼠发生心肌代偿性肥大,心肌细胞受损严重,其ROS及自噬水平均有显著提升;运动组大鼠心肌有增大现象,心肌细胞结构完整,未发生严重损伤,其ROS含量略有提升而自噬水平虽不如疲劳组却亦有大幅提升。当注射ROS抑制剂NAC后,疲劳组大鼠的自噬水平发生了明显的下降。以上实验结果说明运动干涉会促进大鼠心肌细胞的自噬和ROS水平的提升。当运动疲劳时,过度的自噬破坏了细胞结构产生负性影响,而这是通过ROS相关的信号通路实现的。本研究为预防和治疗由运动疲劳引发的心肌疾病和损伤提供了重要的理论依据。
【关键词】：细胞自噬 运动疲劳 ROS 心肌细胞凋亡
【学位授予单位】：东北师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R54
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1 引言8-15
• 1.1 运动疲劳的种类和产生机制8-9
• 1.2 运动疲劳与心肌损伤9
• 1.3 细胞自噬9-11
• 1.4 自噬与心脏疾病11-13
• 1.4.1 自噬与心肌缺血12
• 1.4.2 自噬与缺血再灌注12-13
• 1.5 ROS在运动疲劳及细胞自噬中扮演的角色13-15
• 1.5.1 ROS与运动疲劳13-14
• 1.5.2 ROS与细胞自噬14-15
• 2 实验材料与方法15-20
• 2.1 实验动物15
• 2.2 实验仪器15
• 2.3 药品与试剂15
• 2.4 主要试剂的配置15-16
• 2.5 实验方法16-20
• 2.5.1 分组与训练方案16-17
• 2.5.2 HE染色法及电镜法观察大鼠心脏形态及组织结构变化17-18
• 2.5.3 DCFH-DA探针法检测大鼠心肌细胞ROS含量18-19
• 2.5.4 大鼠心肌细胞自噬水平的检测19
• 2.5.5 统计分析19-20
• 3 实验结果20-27
• 3.1 运动疲劳引起的大鼠心脏形态及组织结构变化20-24
• 3.1.1 运动疲劳诱使大鼠心脏体重比提升20-21
• 3.1.2 运动疲劳诱使大鼠心肌细胞横截面积增大21-22
• 3.1.3 运动疲劳诱使大鼠心肌细胞发生严重损伤22-23
• 3.1.4 运动疲劳诱使大鼠心肌细胞发生自噬23-24
• 3.2 大鼠不同运动条件下引起的自噬水平变化24-27
• 3.2.1 运动疲劳诱使大鼠心肌细胞中ROS水平提升24-25
• 3.2.2 运动疲劳诱导大鼠心肌的细胞自噬水平提升25-27
• 4 讨论27-31
• 结论31-32
• 创新点32-33
• 参考文献33-37
• 英文缩写37-38
• 致谢38

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  本文关键词：运动疲劳通过调节胞内ROS影响心肌细胞自噬的研究，由笔耕文化传播整理发布。

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