CD73 + 人脂肪间充质干细胞通过CD73/腺苷轴促进心肌修复
发布时间：2021-08-18 15:36
背景心肌梗死（myocardial infarction,MI）可导致大量的心肌细胞死亡和心室重塑。由于心肌再生能力十分有限,细胞移植疗法为心脏疾病治疗带来新的曙光。目前间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是细胞治疗研究热点。CD73、CD105和CD90是MSCs显性标记分子,但CD73分子在心肌损伤细胞治疗中的作用鲜有报道。细胞移植治疗心肌损伤时不仅关注于细胞替代和内分泌机制,同时应当高度重视移植细胞对心肌微环境的免疫调控作用。CD73+脂肪间充质干细胞（adiposetissue derived mesenchymal stem cells,ADMSCs）治疗心肌梗死是否参与了免疫调控?亟待我们探讨,全面分析CD73+ADMSCs治疗心肌损伤的机制,为临床开发利用CD73+细胞提供理论和实验依据,给MSCs治疗心肌损伤等疾病提供筛选细胞的分子参考标准。目的1.探讨人ADMSCs治疗心肌损伤时是否存在CD73/腺苷轴。2.评价CD73+ADMSCs移植治疗心肌梗死的疗效,探讨人ADMSCs是否通过CD73/腺苷轴发挥免疫调控作用促进梗死心肌修复。方...
【文章来源】：新乡医学院河南省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
6和P9ADMSCs，倒置荧光显微镜注：A第6代ADMSCs，B第9代ADMSCs，CGFP标记空载病毒转染ADMSCs，DGFP标记CD73干扰病毒转染ADMSCs，标尺：100μm
新乡医学院硕士学位论文242.人ADMSCs流式细胞术检测免疫表型流式细胞术检测显示，第9代人ADMSCs高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105，表达率均在95%以上，低表达CD45，表达率为0.62%(图2)。AFITCPEAPCPerCP-Cy5.5FITCPEBCD29CD44CD73CD90CD105CD45图2P9代ADMSCs表面标记CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD45表达，流式细胞术。注：A对照组，B实验组Fig2TheexpressionofCD29,CD44,CD73,CD90,CD105andCD45markedonthesurfaceofADMSCsinP9generation,Flowcytometry.Note:AControlgroup，BExperimentalgroup3.抑制人ADMSCs中CD73的表达CD73siRNA转染人ADMSCs，感染复数(MOI)值为10，转染结束后，48h时可观察到较弱荧光，72h时看到的荧光最强。Westernblotting和Real-timePCR检测结果显示：CD73蛋白与基因表达均下降，差异有统计学意义（P<0.001）（图3、4）。
新乡医学院硕士学位论文25图3CD73蛋白在各组中的表达,Westernblotting注：ADMSCs+LV是空载病毒组，ADMSCs+CD73siRNA是CD73表达干扰组，与空载病毒组相比，***P＜0.001。Figure3ExpressionofCD73proteinineachgroup,WesternblottingNote:ADMSCs+LVgroupwasno-loadvirusgroup,ADMSCs+CD73siRNAgroupwasCD73expressioninterferencegroup,comparedwiththeno-loadvirusgroup,***P<0.001.
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同来源间充质干细胞表面标记的比较[J]. 杜志朋,殷国田,李苗苗,郭志坤,李琼. 解剖学报. 2019(05)
[2]CD73对骨髓间充质干细胞增殖与衰老的影响[J]. 王琰,李琼,张三林,郭志坤. 解剖学报. 2017(06)
[3]Assessment of left ventricular segmental function after autologous bone marrow stem cells transplantation in patients with acute myocardial infarction by tissue tracking and strain imaging[J]. RUAN Wen, PAN Cui-zhen, HUANG Guo-qian, LI Yan-lin, GE Jun-bo and SHU Xian-hong Department of Cardiology, Zhongshan Hospital of Fudan University, Shanghai 200032, China. Chinese Medical Journal. 2005(14)
本文编号：3350159
【文章来源】：新乡医学院河南省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
6和P9ADMSCs，倒置荧光显微镜注：A第6代ADMSCs，B第9代ADMSCs，CGFP标记空载病毒转染ADMSCs，DGFP标记CD73干扰病毒转染ADMSCs，标尺：100μm
新乡医学院硕士学位论文242.人ADMSCs流式细胞术检测免疫表型流式细胞术检测显示，第9代人ADMSCs高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105，表达率均在95%以上，低表达CD45，表达率为0.62%(图2)。AFITCPEAPCPerCP-Cy5.5FITCPEBCD29CD44CD73CD90CD105CD45图2P9代ADMSCs表面标记CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和CD45表达，流式细胞术。注：A对照组，B实验组Fig2TheexpressionofCD29,CD44,CD73,CD90,CD105andCD45markedonthesurfaceofADMSCsinP9generation,Flowcytometry.Note:AControlgroup，BExperimentalgroup3.抑制人ADMSCs中CD73的表达CD73siRNA转染人ADMSCs，感染复数(MOI)值为10，转染结束后，48h时可观察到较弱荧光，72h时看到的荧光最强。Westernblotting和Real-timePCR检测结果显示：CD73蛋白与基因表达均下降，差异有统计学意义（P<0.001）（图3、4）。
新乡医学院硕士学位论文25图3CD73蛋白在各组中的表达,Westernblotting注：ADMSCs+LV是空载病毒组，ADMSCs+CD73siRNA是CD73表达干扰组，与空载病毒组相比，***P＜0.001。Figure3ExpressionofCD73proteinineachgroup,WesternblottingNote:ADMSCs+LVgroupwasno-loadvirusgroup,ADMSCs+CD73siRNAgroupwasCD73expressioninterferencegroup,comparedwiththeno-loadvirusgroup,***P<0.001.
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同来源间充质干细胞表面标记的比较[J]. 杜志朋,殷国田,李苗苗,郭志坤,李琼. 解剖学报. 2019(05)
[2]CD73对骨髓间充质干细胞增殖与衰老的影响[J]. 王琰,李琼,张三林,郭志坤. 解剖学报. 2017(06)
[3]Assessment of left ventricular segmental function after autologous bone marrow stem cells transplantation in patients with acute myocardial infarction by tissue tracking and strain imaging[J]. RUAN Wen, PAN Cui-zhen, HUANG Guo-qian, LI Yan-lin, GE Jun-bo and SHU Xian-hong Department of Cardiology, Zhongshan Hospital of Fudan University, Shanghai 200032, China. Chinese Medical Journal. 2005(14)
本文编号：3350159
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