体外构建三维血管化组织工程窦房结

发布时间：2022-02-22 13:44

　　目的探究体外诱导兔原代骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）分化为血管内皮细胞（vessel endothelial cells,VECs）和起搏样细胞（pacemaker-like cells）的方法和途径,构建体外三维血管化组织工程窦房结,为心血管疾病的生物起搏提供治疗策略。方法1提取兔骨髓间充质干细胞:提取骨髓,采用全骨髓贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞,并观察其形态学及生长增殖情况。2诱导为起搏样细胞:分离兔心脏窦房结,并采用差速贴壁法联合5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Brd U）法分离纯化窦房结细胞,观察并记录生长情况;用反复冻融法制备窦房结细胞裂解液,以此作为诱导剂将骨髓间充质干细胞诱导为起搏样细胞,免疫荧光染色法检测诱导后的起搏样细胞表面标志物超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道HCN2（Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation,HCN）的表达和免疫细胞化学染色法检测诱导后的起搏样细胞表面标志物肌钙蛋白T（c Tn T）的表达,... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第1章 实验研究
    1.1 实验材料与方法
        1.1.1 实验动物及试剂
        1.1.2 兔骨髓间充质干细胞分离、培养及形态学观察
        1.1.3 兔血管内皮细胞的分离、培养、诱导及鉴定
        1.1.4 兔原代窦房结细胞分离、培养及形态学观察
        1.1.5 兔窦房结细胞裂解液的制备
        1.1.6 兔骨髓间充质干细胞体外诱导分化为起搏样细胞的培养、鉴定
        1.1.7 体外构建三维血管化组织工程窦房结
        1.1.8 统计分析
    1.2 结果
        1.2.1 兔骨髓间充质干细胞的原代培养
        1.2.2 兔原代骨髓间充质干细胞传代培养
        1.2.3 兔原代骨髓间充质干细胞诱导为血管内皮细胞
        1.2.4 兔原代窦房结细胞的分离、提取及细胞形态学观察
        1.2.5 兔骨髓间充质干细胞诱导成起搏样细胞
        1.2.6 体外构建血管化组织工程窦房结
    1.3 讨论
        1.3.1 兔骨髓间充质干细胞体外诱导为起搏样细胞
        1.3.2 兔骨髓间充质干细胞体外诱导为血管内皮细胞
        1.3.3 体外构建血管化组织工程窦房结
    1.4 小结
    参考文献
第2章 综述
    2.1 心脏起搏样细胞的分子机制
    2.2 心脏起搏样细胞和HCN通道
    2.3 生物起搏器构建的种子细胞
    2.4 构建生物起搏的常用方式
        2.4.1 干细胞诱导
        2.4.2 基因转染
        2.4.3 细胞融合
    2.5 生物起搏器的支架材料
    2.6 生物起搏器的移植方式
    2.7 生物起搏器的存在问题
    2.8 结论
    参考文献
结论
致谢
导师简介
作者简介
学位论文数据集


【参考文献】：
期刊论文
[1]起搏器的治疗与发展趋势[J]. 成俞澎,朱国斌,吕慧,王飞,吴旭杰.  临床医药实践. 2018(07)
[2]胶原水凝胶与基质胶作为骨组织工程支架材料表面涂层修饰效果的比较研究[J]. 朱永佳,靳攀,何熠,缪志康,韦庆军.  微创医学. 2018(02)
[3]缝隙连接蛋白α7促进骨髓间充质干细胞转化为心脏起搏样细胞的实验研究[J]. 林毅漳,张晨亮,肖华,林树,宋治远.  第三军医大学学报. 2018(10)
[4]Transforming growth factor-β in stem cells and tissue homeostasis[J]. Xin Xu,Liwei Zheng,Quan Yuan,Gehua Zhen,Janet L.Crane,Xuedong Zhou,Xu Cao.  Bone Research. 2018(01)
[5]血管相关内皮祖细胞标志物研究[J]. 夏鑫,吴明华.  脑与神经疾病杂志. 2018(01)
[6]基因治疗在生物起搏中的研究进展[J]. 李艳君,杨媚,张格格,李乐,唐艳红.  医学研究杂志. 2017(04)
[7]Optimizing stem cells for cardiac repair: Current status and new frontiers in regenerative cardiology[J]. Shant Der Sarkissian,Thierry Lévesque,Nicolas Noiseux.  World Journal of Stem Cells. 2017(01)
[8]组织工程化血管支架材料的研究进展[J]. 刘旭倩,王洁.  医学综述. 2016(19)
[9]心脏自体干细胞移植治疗心肌梗死新进展[J]. 房昊,安毅.  科技视界. 2016(24)
[10]干细胞、微环境与活血化瘀[J]. 张金生,张宝霞,朱慧芳,张阳阳.  中国组织工程研究. 2016(23)

博士论文
[1]人牙龈成纤维细胞构建组织工程化血管的实验研究[D]. 刘旭倩.河北医科大学 2016
[2]血管化组织工程化窦房结的构建及应用基础研究[D]. 张璐萍.第二军医大学 2013
[3]骨髓源性多能成体祖细胞向起搏细胞的诱导分化[D]. 刘艳春.第二军医大学 2010

硕士论文
[1]间充质干细胞对血管内皮前体细胞分化影响的研究[D]. 葛权虎.石河子大学 2017
[2]HCN2基因修饰的骨髓间充质干细胞源性起搏细胞的变时性相关受体的研究[D]. 杨翠翠.安徽医科大学 2017
[3]棕色脂肪组织来源的干细胞向起搏细胞的定向分化[D]. 邓子军.第二军医大学 2013
[4]骨髓间充质干细胞诱导分化为具有起搏功能的心肌样细胞[D]. 蒋伟.郑州大学 2010
[5]慢病毒介导hHCN4基因体外转染骨髓间充质干细胞构建生物起搏器的实验研究[D]. 李晓刚.苏州大学 2009



本文编号：3639566