酪氨酸激酶BTK对心脏纤维化的调控作用及机制研究

发布时间：2022-08-08 16:10

　　目的探究酪氨酸激酶BTK在心脏纤维化发生发展过程中的调控的作用并探索其具体机制,丰富心脏纤维化的发生机制,为高血压或瓣膜病等心肌损伤相关疾病的治疗策略提供新的潜在靶点。方法1.构建心脏纤维化模型:取8-10周的btk-/-（KO）小鼠和野生型小鼠（WT）分别皮下注射ISO（5mg/kg/d,连续7天）或皮下植入AngⅡ泵（1000ng/kg/min,连续28天）。2.观察BTK分子在WT心脏纤维化模型的心脏组织以及TGF-β活化的心脏成纤维细胞中的表达情况。3.观察WT和KO小鼠心脏纤维化模型的心功能、心脏重构和心肌纤维化的差异;检测纤维化相关信号通路活化的差异。4.体外分离WT和KO胎鼠的心脏成纤维细胞,TGF-b刺激后观察观察纤维化相关分子表达、信号通路活化以及肌成纤维细胞的转化情况差异。5.体外分离WT胎鼠心脏成纤维细胞,使用BTK抑制剂Acalabrutinib处理,观察纤维化相关分子的表达、信号通路活化以及肌成纤维细胞转化情况差异。6.利用免疫共沉淀技术,寻找BTK作用的靶分子并研究其作用机制。结果1.BTK的表达水平在心脏纤维化小鼠模型的心脏组织中显著升高,在TGF-b活化... 

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写索引
第一章 绪论
    1.1 心脏纤维化
        1.1.1 心脏纤维化的概述
        1.1.2 心脏纤维化分子机制研究
    1.2 肌成纤维细胞
        1.2.1 肌成纤维细胞的定义
        1.2.2 肌成纤维细胞的起源
        1.2.3 介导肌成纤维细胞转化和激活的分子机制
    1.3 TGF-β
        1.3.1 TGF-β家族概述
        1.3.2 TGF-β对心脏成纤维细胞表型和功能的调节
        1.3.3 在心脏纤维化中TGF-β介导的信号通路
    1.4 BTK
        1.4.1 BTK的概述
        1.4.2 BTK的结构和功能
        1.4.3 BTK的信号通路
        1.4.4 目前BTK在纤维化中的研究
    1.5 本实验研究目的、方法、实验设计和意义
        1.5.1 研究目的
        1.5.2 研究方法
        1.5.3 实验设计
        1.5.4 研究意义
第二章 BTK分子在小鼠心脏纤维化过程中表达升高
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验耗材与试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 分离小鼠心脏成纤维细胞
        2.2.2 刺激体外分离的野生型小鼠心脏成纤维细胞后的BTK表达
        2.2.3 构建小鼠心脏纤维化模型
        2.2.4 PCR
        2.2.5 Western Blot
    2.3 实验结果
    2.4 讨论
第三章 BTK缺失显著改善小鼠ISO/AngII模型中心肌纤维化水平及心功能
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 实验仪器
        3.1.3 实验耗材与试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 构建纤维化模型
        3.2.2 心脏组织切片masson染色
        3.2.3 小鼠心脏超声检测
        3.2.4 PCR
        3.2.5 Western Blot
        3.2.6 体外抑制成纤维细胞BTK活性
        3.2.7 免疫荧光
    3.3 实验结果
    3.4 讨论
第四章 BTK促进心肌纤维化相关信号通路的活化
    4.1 实验材料
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 实验仪器
        4.1.3 实验耗材与试剂
    4.2 实验方法
        4.2.1 构建纤维化模型
        4.2.2 体外分离心脏成纤维细胞
        4.2.3 免疫共沉淀技术
    4.3 实验结果
    4.4 讨论
第五章 主要结论和展望
    5.1 主要结论
    5.2 展望
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的论文



本文编号：3671819