类泛素蛋白FAT10调控钾离子通道Kv7.1的机制研究

发布时间：2022-08-10 11:42

　　研究背景:Kv7.1是一类电压依赖的钾通道,由KCNQ1基因编码,与KCNE1基因编码的mink蛋白相互作用形成复合体,产生缓慢激活的延迟整流钾电流(low delayed rectifier potassium current,I_Ks),在心肌细胞动作电位（action potential,AP）的复极化中发挥重要作用。研究报道Kv7.1通道的功能增强与降低都易诱发心律失常,因此,Kv7.1通道蛋白的稳定性至关重要。近年来,研究人员新发现一种类泛素蛋白FAT10（F-AdjacentTranscript-10,FAT10）,参与了体内众多蛋白质的翻译和修饰。我们团队首次证实在心肌细胞中FAT10通过拮抗特异性底物的泛素化水平来稳定底物蛋白的表达,进而对心肌具有保护作用。然而,FAT10和Kv7.1之间的调控关系尚不明确。研究目的:本研究试图揭示FAT10是否调控Kv7.1的表达,并进一步阐明FAT10调控Kv7.1表达的具体分子机制。研究方法:1.明确FAT10对Kv7.1表达的调控作用:利用原代乳鼠心肌细胞（neonatal rat cardiomyocyte... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
中英文缩略词表
第1章 前言
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验所需细胞
        2.1.2 实验设备和仪器
        2.1.3 实验所需主要试剂
        2.1.4 实验所需主要试剂配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 .乳鼠原代心肌细胞的分离与培养
        2.2.2 原代心肌细胞总蛋白提取
        2.2.3 BCA蛋白浓度的测定
        2.2.4 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳
        2.2.5 蛋白质印记抗体标记与显色
        2.2.6 心肌细胞RNA提取和测定
        2.2.7 逆转录PCR合成c DNA
        2.2.8 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
        2.2.9 腺病毒载体的选择和构建
        2.2.10 干扰片段的选择和构建
        2.2.11 细胞免疫荧光
        2.2.12 统计学分析
第3章 结果
    3.1 原代心肌细胞内FAT10 调控Kv7.1 蛋白表达
    3.2 原代心肌细胞中FAT10与Kv7.1 相互结合
    3.3 原代心肌细胞中Kv7.1经UPS降解
    3.4 FAT10 通过抑制Kv7.1 的泛素化稳定其表达
        3.4.1 FAT10 通过UPS调控Kv7.1 的蛋白表达
        3.4.2 FAT10 影响Kv7.1 的泛素化水平
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究结果
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]交感神经兴奋与1型长QT综合征（LQT1）[J]. 宋苓苓,董超,翟晓晨,高洁,吴捷.  心脏杂志. 2018(06)
[2]心房颤动发病机制的基因学研究进展[J]. 陈芳,杨承健.  中华老年心脑血管病杂志. 2015(07)
[3]KCNQ1钾离子通道及其小分子调节剂[J]. 兰茜,利民,高召兵.  中国新药与临床杂志. 2013(11)
[4]KCNQ1基因与孤立性心房颤动患者关系的探讨[J]. 丰明俊,储慧民,崔翰斌,何斌,刘晶,郁一波,沈才杰,陈晓敏.  中华心血管病杂志. 2013 (01)
[5]KCNQ1基因及其编码钾通道的研究概况[J]. 陈莹,丁久平,徐涛.  生物技术通讯. 2005(05)
[6]哇巴因和乌头碱诱发豚鼠和大鼠心律失常的离子作用靶点[J]. 龚冬梅,单宏丽,周宇宏,董德利,杨宝峰.  药学学报. 2004(05)
[7]心脏猝死的防治建议[J]. 李庚山,李莉,任自文,刘志华,宋有城,朱俊,向晋涛,吴宁,胡大一,黄从新,黄元铸,戚文航,蒋文平.  中国心脏起搏与心电生理杂志. 2002(06)

博士论文
[1]短QT综合征的分子遗传及细胞电生理机制研究[D]. 胡金柱.南昌大学 2012

硕士论文
[1]KCNQ1基因孔区突变导致LQT1的机制研究[D]. 马开龙.西南医科大学 2018



本文编号：3673575