LncRNA-mhrt在心肌肥厚中的作用及机制研究

发布时间：2022-08-11 22:15

　　背景心肌肥厚是心脏对多种诱发因素作出的一种适应性反应。心脏通过心肌肥厚恢复正常功能,消除外界刺激的影响,但长期的心肌肥厚会发展为心力衰竭或心源性猝死,严重危害人类的健康。目前中国心血管疾病的发生率和死亡率一直居高不下,已成为重大的公共卫生问题,而心肌肥厚是心血管疾病发病和猝死的最危险因素之一。现阶段临床上对于心肌肥厚的治疗只能延缓,因此如何在早期发现和预防心肌肥厚的发生已成为临床关注的焦点。而深入研究心肌肥厚发生的分子机制是解决临床上心肌肥厚早期诊断及新的治疗方法研发等问题的关键。长链非编码RNA是一类长度大于200 nt的非编码RNA,在调控心脏发育及心血管疾病的过程中发挥着重要作用。mhrt是肌球蛋白重链7的编码基因通过可变剪切产生的lncRNA分子,可通过Brg1抑制心肌肥厚的发生,发挥保护心脏的作用,并且在小鼠和人的体内mhrt的功能是高度保守的,这就预示着mhrt具有成为临床诊断和治疗心肌肥厚分子靶点的潜力。而lncRNA的调控机制比较复杂,可以在多个层面调控机体的生理功能,特别是其能够与miRNA或者转录因子之间构成分子调控网络,共同行使调控功能。而myocardin作为诱... 

【文章页数】：141 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词对照表
第一章 在心肌肥厚中长链非编码RNA mhrt抑制myocardin的表达和功能
    1.1 前言
        1.1.1 心肌肥厚的研究意义
        1.1.2 转录因子myocardin与心肌肥厚
        1.1.3 长链非编码RNA（lncRNA）与心肌肥厚
    1.2 材料与方法
        1.2.1 实验材料
        1.2.2 实验方法
    1.3 结果
        1.3.1 过表达和敲降mhrt慢病毒质粒的构建及效果检测
        1.3.2 mhrt能够抑制心肌肥厚相关基因的表达
        1.3.3 mhrt能够抑制myocardin在心肌肥厚中的功能
        1.3.4 mhrt可以抑制myocardin的表达
    1.4 讨论
    1.5 结论
第二章 mhrt通过促进KLF4抑制myocardin的表达及心肌肥厚
    2.1 前言
        2.1.1 LncRNA调控基因表达的分子机制
        2.1.2 转录因子myocardin表达相关分子调控机制
        2.1.3 转录因子KLF4与myocardin
        2.1.4 转录因子KLF4与microRNA
    2.2 材料与方法
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验方法
    2.3 结果
        2.3.1 mhrt可以促进KLF4的表达
        2.3.2 mhrt可通过KLF4调节myocardin的表达
        2.3.3 在体外，mhrt可以通过KLF4调控心肌肥厚
        2.3.4 在体内，mhrt可以通过KLF4调控心肌肥厚
        2.3.5 mhrt通过miR-145a-5p调节KLF4的表达
        2.3.6 mhrt可以直接结合miR-145a-5p
        2.3.7 mhrt能减少磷酸化ERK对KLF4蛋白丝氨酸磷酸化的诱导
        2.3.8 mhrt通过干扰磷酸化ERK与KLF4蛋白的结合抑制KLF4蛋白的磷酸化
    2.4 讨论
        2.4.1 mhrt调控myocardin的功能与KLF4mRNA的稳定性相关
        2.4.2 mhrt调控myocardin的功能与KLF4蛋白的磷酸化相关
    2.5 结论
第三章 mhrt通过募集HDAC5调节myocardin蛋白的活性
    3.1 前言
        3.1.1 Myocardin蛋白活性的调控
        3.1.2 HDACs
        3.1.3 LncRNA与HDACs
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验方法
    3.3 结果
        3.3.1 mhrt能够调节myocardin蛋白的乙酰化活性
        3.3.2 mhrt可通过HDAC5调节myocardin蛋白的乙酰化活性
        3.3.3 mhrt能够促进HDAC5的核转位
    3.4 讨论
    3.5 结论
第四章 Myocardin能够反向促进mhrt的表达
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验方法
    4.3 结果
        4.3.1 Myocardin敲降质粒的构建及效果的检测
        4.3.2 Myocardin能够反向促进mhrt的表达
        4.3.3 Myocardin促进mhrt表达的分子机制
    4.4 讨论
    4.5 结论
第五章 结论与展望
    5.1 论文研究结论
    5.2 论文研究内容的创新性与现实价值
    5.3 论文中的不足及下一步工作的展望与设想
参考文献
附录1 攻读博士学位期间取得的科研成果
附录2 攻读博士学位期间参加的科研项目
致谢



本文编号：3675493