尼氟灭酸对高血压大鼠肠系膜微动脉缝隙连接的作用机制的研究

发布时间：2022-11-07 18:14

　　目的：观察尼氟灭酸（niflumic acid, NFA）对大鼠肠系膜微小动脉缝隙连接通讯的影响。 方法：全细胞膜片钳观察1×10-4mol/L NFA对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）肠系膜微小动脉平滑肌细胞缝隙连接通讯的阻断作用，实验记录不同浓度NFA对SHR肠系膜动脉平滑肌细胞膜电流的影响；运用压力肌动图技术观察不同浓度NFA对Wistar大鼠和SHR肠系膜微小动脉的直径变化；Western blot观察Wistar大鼠和SHR肠系膜动脉一级分支和三级分支Cx43的表达差异。应用血管段孵育通过RT-PCR观察不同浓度NFA对缝隙连接蛋白中的Cx43mRNA水平的变化，SHR肠系膜微小动脉平滑肌细胞原代培养应用Western blot观察不同浓度NFA对平滑肌细胞Cx43的改变。 结果：（1）膜片钳记录NFA作用于单个平滑肌细胞达到最大反应的时间为2min，使用不同浓度的NFA记录的平滑肌细胞电流具有浓度依赖性（P＜0.01, n=8）。1×10-4mol/L的NFA作用于一段血管可以显著降内向电流，能够阻断缝隙连... 

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
前言
材料与方法
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂
        1.3 主要实验仪器
    2 方法
        2.1 膜片钳标本制备
        2.2 膜片钳记录
        2.3 大鼠无创血压测定
        2.4 压力肌动图标本制备
        2.5 压力肌动图技术记录血管直径变化
        2.6 肠系膜动脉一级分支和三级分支蛋白提取
        2.7 蛋白质浓度测定和处理步骤
        2.8 平滑肌细胞原代培养
        2.9 平滑肌细胞鉴定
        2.10 NFA 处理平滑肌细胞
        2.11 Western blot 测定 Cx43 的表达水平
        2.12 Western Blot 试剂配制及步骤
        2.13 血管段孵育及总 RNA 的提取
        2.14 RNA 逆转录
        2.15 PCR 扩增反应
        2.16 统计学方法
实验结果
    1 NFA 对一段血管电生理学特性影响
    2 NFA 作用于大鼠肠系膜微小动脉平滑肌细胞的时间依赖性
    3 NFA 作用于大鼠肠系膜微小动脉平滑肌细胞的浓度依赖性
    4 Wistar 大鼠和 SHR 尾动脉血压的比较
    5 NFA 对 Wistar 大鼠和 SHR 肠系膜微小动脉的舒张反应
    6 Wistar 大鼠和 SHR 肠系膜动脉一级分支和三级分支 Cx43 的表达结果
    7 不同浓度 NFA 处理血管段 Cx43 mRNA 半定量分析
    8 原代平滑肌细胞鉴定
    9 不同浓度 NFA 处理平滑肌细胞 Cx43 的表达结果
讨论
结论和展望
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简介
导师评语


【参考文献】：
期刊论文
[1]肾素血管紧张素醛固酮系统拮抗剂对自发性高血压大鼠心肌缝隙连接蛋白Cx43表达的影响[J]. 谭力力,李潞,刘丽敏,赵红丽.  四川大学学报(医学版). 2013(04)
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本文编号：3704165