miR-152-3p通过调控PTEN的表达影响Stanford A型急性主动脉夹层的发生

发布时间：2022-12-04 00:41

　　目的:研究miR-152-3p与PTEN在Stanford A型急性主动脉夹层中的表达,以及二者之间的互作关系对急性主动脉夹层发生的影响。方法:1)收集来我院行主动脉夹层手术病人的主动脉壁组织标本30例作为夹层组,行冠状动脉搭桥手术病人的主动脉壁组织标本30例作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-152-3p的相对表达量,蛋白质印迹法（western blot）检测PTEN蛋白的相对表达量,HE染色、Masson染色观察主动脉壁组织形态。2)培养人主动脉平滑肌细胞,分别将miR-152-3p mimic、miR-152-3p mimic control、miR-152-3p inhibitor、mi R-152-3p inhibitor control、空白对照组（分别为mimic组、mimi-con组、inhibitor组、inhibitor-con组、NC组）对细胞进行转染,完成转染操作后,在温箱中培养6h后,置换新鲜的完全培养基,接着培养48h后收集细胞,采用western blot法检测PTEN蛋白及PTEN/AKT通路上相关蛋白的表达,采用流式... 

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 研究对象
    2.2 主要试剂与仪器
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 qRT-PCR检测mi R-152-3p、PTEN mRNA的表达
        2.3.2 western blot检测蛋白表达差异
        2.3.3 HE、Masson染色
        2.3.4 血管平滑肌细胞的培养及转染
        2.3.5 流式细胞术检测凋亡
        2.3.6 统计方法
3 结果
    3.1 miR-152-3p在主动脉壁组织中的表达
    3.2 PTEN在主动脉壁中的表达
    3.3 组织学病理结果
        3.3.1 HE染色结果
        3.3.2 Masson染色结果
    3.4 qRT-PCR验证转染效率
        3.4.1 转染后miR-152-3p的表达
        3.4.2 转染后PTEN m RNA的表达
    3.5 Western Blot检测蛋白表达差异
        3.5.1 过表达miR-152-3p对 PTEN、Bax、Bcl-2、p-Akt/Akt的影响
        3.5.2 抑制miR-152-3p的表达对PTEN、Bax、Bcl-2、p-Akt/Akt的影响
    3.6 流式细胞术检测凋亡水平
4 讨论
5 结论
本研究创新性及自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3707283