SUMO1修饰Drp1促BNIP3依赖性线粒体铁源性ROS介导Apelin-13诱导心肌细胞肥大

发布时间：2023-03-06 20:04

　　目的:APJ是与血管紧张素受体有同源性的G蛋白偶联受体,Apelin是其内源性配体。研究发现Apelin/APJ系统参与心力衰竭、高血压等心血管疾病。本实验室前期研究发现Apelin-13通过铁自噬-SFXN1依赖性线粒体铁超载途径促心肌细胞肥大。线粒体自噬(Mitophagy)作为特异性清除损伤线粒体的选择性自噬过程,同时参与诱导线粒体铁代谢紊乱和ROS的产生。本课题拟研究Apelin-13对线粒体自噬以及的BNIP3依赖性线粒体自噬途径对Apelin-13诱导的铁源性ROS影响,并在前期研究基础上探讨SUMO1修饰Drp1促BNIP3依赖性线粒体铁源性ROS途径是否参与Apelin-13诱导心肌细胞肥大,揭示Apelin-13/APJ系统诱导心肌肥厚的新分子机理,为进一步阐明APJ受体能否成为抗心肌肥厚疾病的新靶标提供理论依据。方法:1、Western Blot:检测大鼠H9c2心肌细胞Beclin 1,LC3II/I,BNIP3,Drp1,SUMO1,BNP的表达;2、RNA干扰:设计RNA干扰链分别干扰H9c2心肌细胞中SUMO1,Drp1,BNIP3的表达;3、Mito-SO...

【文章页数】：103 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 绪论
第2章 实验材料
    2.1 实验细胞
    2.2 实验组织
    2.3 主要试剂
    2.4 主要仪器
第3章 实验方法
    3.1 H9c2 细胞培养
    3.2 Western blot(蛋白免疫印迹)
    3.3 线粒体ROS检测(MitoSOX?)
    3.4 线粒体螯合铁检测(RPA荧光探针)
    3.5 SiRNA干扰
    3.6 免疫组化
    3.7 透射电镜
    3.8 免疫荧光
    3.9 H9c2 大鼠心肌细胞肥大的检测
    3.10 统计学方法
第4章 实验结果
    4.1 Apelin-13 诱导H9c2 心肌细胞BNIP3 依赖线粒体自噬的发生
    4.2 Apelin-13 促进H9c2 线粒体分裂蛋白Drp1 的表达
    4.3 Mdivi-1抑制Apelin-13 诱导的H9c2 心肌细胞BNIP3 依赖线粒体自噬
    4.4 Drp1-siRNA明显逆转Apelin-13 诱导的H9c2 心肌细胞BNIP3 依赖线粒体自噬和线粒体铁源性ROS的产生
    4.5 Apelin-13 促进H9c2 心肌细胞类泛素化蛋白SUMO1 的表达及SUMO1与Drp1 的共定位
    4.6 SUMO1-siRNA显著抑制Apelin-13 诱导的BNIP3 依赖线粒体自噬和线粒体铁源性ROS的产生
    4.7 BNIP3-siRNA抑制Apelin-13 诱导的线粒体铁超载以及线粒体铁源性ROS的产生
    4.8 线粒体靶向抗氧化剂Mito-TEMPO抑制Apelin-13 诱导的SUMO1 化修饰Drp1和BNIP3 依赖线粒体自噬
    4.9 SUMO1 修饰Drp1 介导Apelin-13 促心肌细胞肥大
    4.10 BNIP3 依赖线粒体铁超载介导Apelin-13 促心肌细胞肥大
    4.11 人尸检心肌肥厚心脏标本、双肾双夹肾血管性高血压模型大鼠心脏组织以及外源性注射Apelin-13的C57BL/6J小鼠心脏标本中BNP、SUMO1、Drp1、BNIP3 呈高表达
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
文献翻译
作者攻读学位期间的科研成果
致谢



本文编号：3757295