高通量测序分析急性心肌梗死患者TCR CDR3免疫组库的研究

发布时间：2023-05-13 13:49

　　目的:测序并建立急性心肌梗死患者外周血TCR CDR3的免疫组库,分析急性心肌梗死患者TCR CDR3免疫组库的特点,比较急性心肌梗死患者组与健康对照组免疫组库的多样性差异。方法:(1)根据纳入的标准、排除的标准分为急性心肌梗死患者组与健康对照组,并收集性别、年龄、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞比例(NEUT%)、淋巴细胞比例(LY%)、单核细胞比例(MONO%)、高敏肌钙蛋白I(hs-Tn I)、病变血管支数等临床数据,进行初步统计分析。(2)利用人血淋巴细胞分离液、RNA提取试剂盒及第一链c DNA合成试剂盒获得各组外周血总淋巴细胞的cDNA溶液。(3)应用针对T淋巴细胞基因靶点特异性的内、外两套引物在2*Taq Plus Master Mix II作用下进行巢式PCR扩增得到各自对应的扩增产物,后进行凝胶电泳成像,经剪切得到目的片段。(4)利用高通量测序技术(HTS)测序分别得到V基因、J基因、VJ基因对(即CDR3序列)及CDR3区氨基酸(AA)序列的分布,建立TCR CDR3免疫组库。(5)对比急性心肌梗死患者组与健康对照组,探讨急性心肌梗死患者TCR CDR3免疫组库的多...

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
实验材料
    1 实验用血来源
    2 主要实验试剂
    3 主要实验仪器
    4 基因测序建库
实验方法
    1 研究对象分组
    2 淋巴细胞提取
    3 总RNA提取
    4 逆转录cDNA的合成
    5 巢式PCR扩增
    6 电泳成像检测
    7 高通量测序建库
    8 数据分析
实验结果
    1 临床数据分析
    2 TCRCDR3免疫组库分析
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号：3815944