斑马鱼RPL5和RPL11缺陷致使DBA病征的分子机制研究

发布时间：2023-05-28 13:39

　　红细胞再生障碍性贫血（Diamond-Blackfan anemia, DBA）是一种遗传性骨髓衰竭综合征，患者主要表现为先天性红细胞发育不良以及相关的身体畸形，严重影响其生命健康。临床研究发现有多于50%的患者伴有不同的核糖体基因突变，其中有将近20%的患者表现为核糖体蛋白RPL5和RPL11异常。然而在DBA患者中，RPL5和RPL11缺陷致使造血功能异常的机制尚未被完全阐明。本研究以斑马鱼为模式生物，通过显微注射吗啡琳类似物修饰的反义寡核苷酸RPL5MO（morpholino）和RPL11MO分别获取RPL5和RPL11缺陷的斑马鱼胚胎，通过全基因组RNA-Seq数据分析，O-染色，苏丹黑B-染色，血细胞相关标记基因的胚胎整体原位杂交以及血液血管相关标记基因的实时定量来检测RPL5和RPL11缺陷对血液生发的影响，并分析证实RPL5和RPL11缺失导致造血功能不足；通过相应RPL5MO和RPL11MO分别与p53MO共注射实验以及Western Blotting检测磷酸化的AKT（pAKT），磷酸化的ERK（pERK）各自含量的变化，从而探索RPL5和RPL11缺失致使造血功能不...

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略词表
引言
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法
2 结果
    2.1 RPL5 和 RPL11 缺陷对斑马鱼胚胎形态特征的影响
    2.2 检验 RPL5 MO 和 RPL11 MO 功效的载体构建及检验
    2.3 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑马鱼生物信息学分析
    2.4 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑马鱼胚胎经典染色
    2.5 血液相关标记基因探针的制备
    2.6 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑马鱼胚胎原位杂交
    2.7 p53 途径与 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足
    2.8. RT-PCR 分析血液相关标记基因的表达
    2.9 PI3K/AKT,MAPK/ERK 通路与 RPL 缺陷致使造血功能不足
3 讨论
    3.1 本研究概述
    3.2 通过 MO 技术获取 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑马鱼胚胎
    3.3 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足
    3.4 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足的相关信号机制
致谢
参考文献
硕士期间研究成果
附录



本文编号：3824693