铁过载对骨髓造血功能的影响及作用机制

发布时间：2023-10-20 20:41

　　目的 探讨铁过载对骨髓造血干祖细胞造血功能的影响及作用机制。 方法 1.通过4Gy γ,射线全身照射和(或)右旋糖酐铁腹腔注射建立正常和骨髓损伤情况下的铁过载小鼠模型,通过①病理组织切片苏木精-伊红染色/普鲁士蓝铁染色的方法分析铁过载小鼠肝脏、脾脏、骨髓的形态及铁沉积情况；②流式细胞仪检测骨髓单个核细胞(BMMNCs)内可变铁池(LIP)水平验证铁过载模型的成功建立。 2.使用细胞计数仪检测外周血象及BMMNCs数目；采用流式细胞术分析各系造血细胞比例；采用甲基纤维素半固体培养法检测造血祖细胞增殖功能；采用竞争性移植实验分析骨髓细胞移植后造血重建能力；采用磁珠结合流式细胞仪分选造血干细胞单克隆培养检测造血干细胞增殖功能。 3.采用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针检测铁过载前后骨髓细胞活性氧(ROS)水平；使用Real-time PCR方法检测ROS相关基因NOX4、GPX水平的表达。 4.经地拉罗司(DFX)去铁或经NAC抗氧化治疗后,检测上述指标的变化。 结果 1.小鼠肝脏、脾脏、骨髓内可见大量铁沉积,BMMNCs内LIP水平明显升高,提示铁过载模型成功建立； 2...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、 小鼠铁过载模型的建立及其对骨髓造血功能的影响
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验材料
        1.1.2 实验方法
        1.1.3 统计学处理
    1.2 结果
        1.2.1 铁过载小鼠的一般表现
        1.2.2 小鼠铁过载模型的建立
        1.2.3 铁过载对外周血象和骨髓单个核细胞数目的影响
        1.2.4 铁过载对造血干祖细胞数量的影响
        1.2.5 铁过载损伤造血祖细胞的增殖功能
        1.2.6 铁过载损伤造血干细胞的增殖功能
        1.2.7 铁过载抑制造血干细胞造血重建能力
        1.2.8 铁过载提升骨髓各系细胞ROS水平
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、 铁过载对骨髓损伤小鼠造血功能的作用及机制研究
    2.1 材料和方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验方法
        2.1.3 统计学处理
    2.2 结果
        2.2.1 骨髓损伤小鼠铁过载模型的建立
        2.2.2 骨髓损伤小鼠铁过载对BMMNCs数目及比例的影响
        2.2.3 骨髓损伤小鼠铁过载对骨髓造血祖细胞功能的影响
        2.2.4 骨髓损伤小鼠铁过载对骨髓造血干细胞功能的影响
        2.2.5 骨髓损伤小鼠铁过载对造血干细胞造血重建能力的影响
        2.2.6 骨髓损伤小鼠铁过载对外周血象的影响
        2.2.7 铁过载小鼠脾脏瑞氏染色情况
        2.2.8 铁过载引起脾脏髓外造血
        2.2.9 骨髓损伤小鼠铁过载对各系ROS水平的影响
        2.2.10 铁过载对受照小鼠c-kit+细胞内NOX4和GPX表达的影响
    2.3 讨论
    2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述一 铁过载在血液系统疾病中的危害及其治疗研究进展
    参考文献
综述二 活性氧物质与骨髓造血干细胞衰老研究进展
    参考文献
致谢



本文编号：3855506