miR-208在正常和心肌肥厚组织中的表达和作用研究

发布时间：2024-03-17 10:30

　　目的： 探讨正常大鼠和心肌肥厚模型大鼠心肌组织中miR-208的表达规律,明确miR-208在肥厚心肌过程中发挥的作用,并对其可能的调控机制进行初步探究,为研究miRNA在心肌肥厚的病理生理过程中的功能作用提供新的论据,为心血管疾病防治提供新思路新方向。 方法： (1)20只雄性SD大鼠,体重200g左右,简单随机法分成对照组10只和实验组10只。实验组大鼠采用腹主动脉缩窄术进行心肌肥厚造模,分离腹主动脉和肾动脉后,在肾动脉上方约lcm处,将直径为0.7mm的注射针头与腹主动脉一起结扎,然后迅速抽出针头。对照组大鼠仅行开腹手术,不缩窄腹主动脉。7周后分别对实验组和对照组大鼠进超声心动图检查,确定实验组造模成功后,处死大鼠,取出心脏,留取左心室,计算心重指数(HW/BW)、左心室重量指数(LVW/BW)。 (2)将正常和肥厚的左心室组织用Trizol法提取心肌组织RNA,然后通过荧光定量PCR检测miR-208在正常和肥厚的心肌组织中的各自表达量并进行统计分析。 (3)用生物信息学的方法预测miR-208的靶基因。用实时荧光定量PCR的方法检测正常和肥厚心肌组织中miR-208的靶基因m...

【文章页数】：35 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
目录
引言
第一章 文献研究
    1.1 心肌肥厚研究进展
    1.2 MIRNAs与心肌肥厚
        1.2.1 miRNAs的生成与作用机制
        1.2.2 和心肌肥厚相关的miRNA研究现状
        1.2.3 miRNA应用于心肌肥厚临床诊疗的前景
第二章 实验研究
    2.1 实验仪器
    2.2 材料
    2.3 动物模型建立方法
    2.4 超声心动图检查
    2.5 心肌组织的取材、保存
    2.6 心肌组织TOTAL RNA的提取
    2.7 RNA凝胶电泳
    2.8 RT-PCR检测
        2.8.1 逆转录反应(20ul)
        2.8.2 引物设计合成
        2.8.3 实时荧光定量PCR(20ul)
    2.9 统计分析
第三章 结果
    3.1 大鼠心肌肥厚模型
        3.1.1 超声心动图结果
        3.1.2 大鼠解剖结果
    3.2 总RNA的提取
    3.3 荧光定量PCR测定MIR-208的表达结果
        3.3.1 miR-208及内参U6的溶解曲线图
        3.3.2 两组心肌组织中miR-208的相对表达量
    3.4 MIR-208调节的靶基因预测
        3.4.1 p21及内参beta-actin的溶解曲线图
        3.4.2 两组心肌组织中p21的荧光定量PCR结果
第四章 分析讨论
    4.1 大鼠心肌肥厚模型的建立
    4.2 MIR-208变化与心肌肥厚
    4.3 MIR-208的可能靶基因和其功能
第五章 结论
参考文献
致谢



本文编号：3930894