CaMEK基因靶向转导减轻老龄心肌缺血再灌注损伤的机制研究

发布时间：2024-03-22 18:33

　　目的:本研究旨在探讨年龄因素对缺血后适应心肌保护作用的影响,研究老龄缺血后适应心肌保护作用消失的分子机制;通过研究巨细胞病毒(CMV)启动子与鸡β-肌动蛋白(CBA)启动子重组AAV9载体的组织表达特异性,筛选获得较好的可用于心脏疾病基因治疗的AAV9载体;并使用携带Ca MEK(Constitutively active MEK1,Ca MEK)基因的重组AAV9载体,靶向转导老龄小鼠心脏,探讨外源导入Ca MEK能否作为基因治疗药物,具有靶向激活ERK1/2通路,减少心肌梗死、抑制心肌细胞凋亡、防治老龄心肌缺血再灌注损伤的作用及机制。本研究包括:①应用小鼠Langendorff离体心脏灌流系统,对比研究缺血后适应对年轻与老龄小鼠心肌保护作用的差异,阐明缺血后适应心肌保护作用年龄异质性的分子机制。②通过体内外转导实验,对比研究杆状病毒载体系统包装制备的CMV与CBA启动子的重组AAV9载体介导GFP基因在小鼠体内的组织表达特异性、表达时间点、安全性,筛选更适宜用于心脏疾病基因治疗的重组AAV9载体。③靶向转导Ca MEK基因至老龄小鼠心肌,通过离体及在体心肌缺血再灌注模型,探讨Ca ...

【文章页数】：131 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
前言
第一部分 缺血后适应对年轻及老龄小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其分子机制
    1 研究内容与方法
        1.1 实验动物与分组
        1.2 主要仪器设备和试剂
        1.3 主要方法
        1.4 统计学分析
    2 结果
    3 讨论
    4 小结
第二部分CMV及CBA启动子重组AAV9载体对小鼠心肌组织特异性表达研究
    1 研究内容与方法
        1.1 实验动物与分组
        1.2 主要器材和试剂配制方法
        1.3 实验方法
        1.4 统计学分析
    2 结果
    3 讨论
    4 小结
第三部分Ca MEK基因靶向转导减轻老龄心肌离体及在体心肌缺血再灌注损伤
    1 研究内容与方法
        1.1 研究对象
        1.2 主要试剂及仪器
        1.3 病毒转染
    2 结果
    3 讨论
    4 小结
结论
致谢
参考文献
综述 缺血后适应机制及并发症研究进展
    参考文献
攻读博士学位期间获得的学术成果
个人简历
导师评阅表



本文编号：3934798