沉默CrkL对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和生存力的影响及其机制

发布时间：2024-06-07 22:42

　　目的探讨沉默CrkL对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和生存力的影响及其机制。方法分别用空白试剂、阴性慢病毒和CrkL RNAi慢病毒(沉默CrkL mRNA)感染H9C2心肌细胞,并进行缺氧/复氧(H/R)干预。实验分为空白组、阴性病毒组、CrkL沉默组、空白+H/R组、阴性病毒+H/R组、CrkL沉默+H/R组。用RT-PCR法检测心肌细胞CrkL mRNA的表达,蛋白印迹分析法检测心肌细胞CrkL蛋白、p-ERK1/2蛋白表达,MTT法检测细胞的增殖率,流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果 CrkL沉默组较空白组和阴性病毒组,CrkL沉默+H/R组较空白+H/R组和阴性病毒+H/R组CrkL mRNA、CrkL蛋白、p-ERK1/2蛋白、细胞增殖率均降低(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率均增加(P<0.01)。结论沉默CrkL能加重缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和生存力降低。该过程可能是由p-ERK1/2蛋白表达降低介导的。

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图３Ｈ９Ｃ２心肌细胞的增殖率Ａ：空白组；Ｂ：阴性病毒组；Ｃ：ＣｒｋＬ沉默组；Ｄ：空白＋Ｈ／Ｒ组；：阴性病毒组；沉默组；：缺

第１１期．张志升，等．沉默ＣｒｋＬ对缺氧／复氧诱导的心肌细胞凋亡和生存力的影响及其机制·１２７５·图３Ｈ９Ｃ２心肌细胞的增殖率Ａ：空白组；Ｂ：阴性病毒组；Ｃ：ＣｒｋＬ沉默组；Ｄ：空白＋Ｈ／Ｒ组；Ｅ：阴性病毒＋Ｈ／Ｒ组；Ｆ：ＣｒｋＬ沉默＋Ｈ／Ｒ组；Ｈ／Ｒ：缺氧／复氧．＊＊Ｐ＜０．０....

图2.1感染H9C2心肌细胞Fig2.1InfectionofH9C2cardiomyocytes

重庆医科大学硕士研究生学位论文(X±S)来表示，多组间的比较则采用单因素方差分析（One-wayANOVA）的方法，两组间比较采用Tukey检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。2.实验结果2.1慢病毒转染H9C2心肌细胞效率测定分别将空白试剂、阴性慢病毒、....

图2.2H9C2心肌细胞CrkLmRNA表达Fig2.2ExpressionofCrkLmRNAinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivirusgroup;C:CrkLsilencegroup;D:Blank+H/Rgroup;

图2.2H9C2心肌细胞CrkLmRNA表达Fig2.2ExpressionofCrkLmRNAinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivirusgroup;C:CrkLsilen....

图2.3H9C2心肌细胞CrkL、p-ERK1/2蛋白表达Fig2.3ExpressionofCrkLandp-ERK1/2proteinsinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivirusgroup;C:CrkLsilencegroup;D:Blank+

图2.3H9C2心肌细胞CrkL、p-ERK1/2蛋白表达Fig2.3ExpressionofCrkLandp-ERK1/2proteinsinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivi....

本文编号：3991064