钾离子通道Kir2.1/KCNJ2对大鼠血管平滑肌细胞表型转换的影响及调控机制

发布时间：2024-11-02 14:50

　　第一部分Kir2.1-shRNA慢病毒载体的构建包装及其对大鼠血管平滑肌细胞Kir2.1基因敲减效率的测定目的首先构建针对SD大鼠内向整流钾离子通道2.1 （inwardly rectify K+channel2.1,Kir2.1）基因的特异性短发卡 RNA （short hairpin RNA, shRNA）表达的慢病毒（Lentivirus, LV）干扰载体,然后转染大鼠胸主动脉平滑肌细胞（rat thoracic aorta vascular smooth muscle cells , RASMCs）检测慢病毒对 Kir2.1基因敲减的效率。方法根据GenBank公布的NM₀17296.1序列确定四条针对Kir2.1基因cds区的小干扰 RNA （small interfering, siRNA）序列（shRNAl-4）,同时设计一条阴性对照序列用于shRNA阴性对照（Negative Control, NC）,共组建与shRNA相对应的5条互补的单链DNA。慢病毒颗粒由包装质粒pGag/Pol、pRev、pVSV-G和shRNA重组穿梭质粒组成,进行测序鉴定...

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
英文摘要
缩略语
前言
文献综述
    综述-1 血管平滑肌细胞表型转换机制的研究进展
    综述-2 内向整流钾离子通道Kir2.1的研究进展
第一部分 Kir2.1-shRNA慢病毒载体的构建包装及其对大鼠血管平滑肌细胞Kir2.1基因敲减效率的测定
    1.1 前言
    1.2 试剂与器材
    1.3 主要实验方法
    1.4 结果
    1.5 讨论
    1.6 结论
第二部分 Kir2.1-shRNA-Lv介导的Kir2.1基因沉默对PDGF-BB诱导的RASMCs增殖、迁移及表型蛋白影响研究
    2.1 前言
    2.2 试剂与器材
    2.3 主要实验方法
    2.4 结果
    2.5 讨论
    2.6 结论
第三部分 慢病毒介导的Kir2.1基因沉默对大鼠颈动脉球囊损伤新生内膜影响的研究
    3.1 前言
    3.2 试剂与器材
    3.3 主要实验方法
    3.4 结果
    3.5 讨论
    3.6 结论
第四部分 Kir2.1参与调控PDGF-BB诱导的RASMCs表型转换的机制研究
    4.1 前言
    4.2 试剂与器材
    4.3 主要实验方法
    4.4 结果
    4.5 讨论
    4.6 结论
全文总结及展望
参考文献
致谢
作者简介
在学期间发表的主要学术论文



本文编号：4009681