氧化应激在稳定性冠心病患者内皮祖细胞变化中的作用及机制的研究

发布时间：2025-03-20 06:39

　　冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)严重危害人类健康,被称为"人类健康第一杀手",在我国也不例外,近年来已成为我国居民的主要致死病因之一。冠心病发生、发展的机制十分复杂,近年的研究表明内皮功能障碍在冠心病的发生、发展中扮演关键角色。内皮功能障碍的本质是内皮损伤和修复之间动态平衡的破坏,而内皮祖细胞(EPCs)在内皮损伤后的修复中起重要作用。EPCs参与缺血组织的血管新生、促进损伤血管内皮的修复、维持内皮功能完整。近年的研究表明氧化应激对于EPCs的功能具有重要作用。氧化应激是指活性氧族(ROS)产生过多或发生代谢障碍并超过内源性抗氧化防御系统对其的消除能力时,反应性氧化物包括超氧阴离子(O2-)、过氧化氢(H202)和羟基产物(-OH),通过与DNA、蛋白质和脂质相互作用,产生过多的损伤的DNA碱基、蛋白质氧化产物和脂质过氧化产物,并导致溶酶体、线粒体的损伤。研究表明氧化应激使EPCs动员减少,削弱EPCs的粘附、增殖、迁移能力,促进EPCs的衰老,诱导其凋亡。研究还表明在内皮细胞和干/祖细胞,ROS主要来自NADPH氧化酶。NADPH氧化酶是ROS主要调控酶,可以作为氧化应激状态的一...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．倒置显微镜下ＥＰＣｓ的形态

２．１循环ＥＰＣｓ的分离、培养和鉴定??采用密度梯度离记、法从成人外周血中分离获得的单个核细胞接种ＨＦＮ包被的??培养扳后，体外培养至７ｄ后形成了梭形的内皮样细胞（见图１－Ａ），我们称这些细??胞早期ＥＰＣｓ。此后，它们没有复制并在４周内逐渐消失。我们观察到另一群具有??不同形态....

图２．激光共聚焦显微镜鉴定心６？〔８

培养扳上呈＂铺路石样＂形状，我们称之为晚期内皮祖细胞。用Ｄｉｌ－ａｃＬＤＬ和??Ｆ打Ｃ－ＵＥＡ－Ｉ对贴壁细胞进行双染包后，置激光共聚焦显微镜下观察，ＵＥＡ－Ｉ和??Ｄｉｌ－ＤＬ双染仓阳性细胞被认为是正在分化的ＥＰＣｓ?（化图２）。此外，我们采用流式??细胞仪检测了?ＥＰＣｓ的表面....

图５?（Ａ）?ｑＰＣ民检测抗氧化酶Ｇｐｘ，?Ｃｕ／ＺｎＳＯＤ，ＭｎＳＯＤ的ｍＲＮＡ表达情况；??与对照组相比，ＣＡＤ患者Ｇｐｘ和ＭｎＳＯＤ的ｍＲＮＡ表达分别下降了?４０％和４８％，??而?Ｃｕ／ＺｎＳＯＤ??

学博丄－学位论文?正文巧一部我们从稳定型冠记病ＥＰＣｓ中抗氧化酶的转录和翻译水平进一步检测，结果提示ＣＡＤ患者ＥＰＣｓ内Ｇｐｘ和ＭｎＳＯＤ的ｍＲＮＡ和蛋白表达ｎＳＯＤ?则无显著差异（ｉＶ＝２０，１８，?＊户＜０．０５）。（图?５）??

图６?ＥＬＩＳＡ试剂盒检测ＥＰＣｓ内ＶＥＧＦ，比－８，ＳＤＦ－１及ＨＧＦ浓度

２２４２．０±２３０．３ｐｇ／ｍｌ毎?＾１０６?个细胞，ＳＤＦ－１?和?ＨＧＦ?的浓度分别为?９３５．４±ｌｌ２．０ｐｇ／ｍｌ??和１２４４±１９３．邸ｇ／ｍｌ毎ｌｘｌ０６个细胞，由此可见，冠记、病患者ＥＰＣｓ的旁分泌细胞??因子ＶＥＧＦ，ｍ－８和ＳＤＦ－１减少，而ＨＧＦ浓度则在....

本文编号：4037543