硫化氢易化血管钙化大鼠颈动脉窦压力感受性反射

发布时间：2017-07-26 15:29

  本文关键词：硫化氢易化血管钙化大鼠颈动脉窦压力感受性反射

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【摘要】：目的:血管钙化(Vascular Calcification,VC)是指钙盐在血管壁的异位沉积,是包括高血压在内的多种血管病变的共同病理基础和心血管事件的独立危险因素。钙化血管压力感受性反射敏感性显著降低。H_2S具有改善血管钙化的作用,并且能够增加正常大鼠或高血压大鼠压力感受性反射敏感性。因此,本研究旨在证实H_2S具有易化血管钙化大鼠压力性反射敏感性的作用。方法:1 180-200g的雄性SD大鼠随机分为4组(n=6):对照组(Control,Con),NaHS(56μmol/L,腹腔注射)组,血管钙化组(Cal),Cal+NaHS(56μmol/L,腹腔注射)组。应用维生素D3(300000 IU/kg,肌注)和尼古丁(25 mg/kg,灌胃)制备大鼠血管钙化模型。Con组和NaHS组分别用相同剂量的溶剂肌注和灌胃。相同的条件饲养4周后,运用本实验室自行设计的实验程序,隔离灌流各组大鼠的颈动脉窦区,同时记录动脉血压,绘制压力感受性反射功能曲线(functional curve of carotid baroreceptor,FCCB),记录各功能参数。ELISA法检测血浆碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)活性;苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,H-E)染色观察钙化主动脉和颈总动脉的病理学改变;化学法检测血浆H_2S的含量;蛋白印迹法(Western blot)检测胸主动脉和颈动脉血管平滑肌收缩表型蛋白(Calponin和SM22α)、成骨样细胞表型蛋白(BMP2和RUNX2)以及内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)蛋白(CHOP、GRP78和Caspase12)表达水平。2 180-200g的雄性SD大鼠制备血管钙化模型,运用本实验室自行设计的实验程序,急性隔离灌流各组大鼠的颈动脉窦区,记录动脉血压,绘制FCCB。应用不同浓度NaHS(25,50,100μmol/L)急性隔离灌流,观察其对血管钙化大鼠颈动脉窦压力感受性反射(carotid sinus baroreflex,CSB)的作用。结果:1与con组和nahs组相比,cal组大鼠动脉血压显著升高,血浆h2s含量显著降低。cal+nahs组大鼠较cal组大鼠动脉血压显著降低,h2s含量显著升高。cal组血浆alp活性显著高于con组(170.0±5.98u/lvs.37.4±3.87u/l,p0.05),而cal+nahs组血浆alp活性显著低于cal组(52.0±6.51u/l,p0.05)。h-e染色显示cal组大鼠胸主动脉和颈总动脉中膜弹性板增厚、卷曲、断裂,结构紊乱。cal+nahs组中膜的弹性板的厚度和结构有一定程度的改善。与con组相比,cal组大鼠胸主动脉和颈动脉血管平滑肌收缩表型蛋白calponin和sm22α明显下调,成骨样细胞表型蛋白bmp2和runx2以及ers蛋白chop、grp78和caspase12明显上调(allp0.05)。与cal组相比,cal+nahs组calponin和sm22α蛋白表达上调,bmp2、runx2、chop、grp78,caspase12蛋白表达均明显下调(allp0.05)。cal组与con组相比,fccb向右上方移位,曲线斜率(peakslop,ps)由0.34±0.01降至0.24±0.01;血压反射性下降幅度(reflexdecrease,rd)由37.6±0.78mmhg下降至29.1±0.92mmhg;阈压(thresholdpressure,tp)由74.3±0.90mmhg增加至83.3±1.10mmhg;平衡压(equilibriumpressure,ep)由96.7±0.52mmhg增加至115.0±1.39mmhg;饱和压(saturationpressure,sp)由195.5±2.82mmhg增加至204.3±1.98mmhg(allp0.05)。cal+nahs组与cal组相比,fccb向左下方移位,ps由0.24±0.01升至0.30±0.01;rd由29.1±0.92mmhg升至32.0±0.77mmhg;tp由83.3±1.10mmhg降至78.6±1.37mmhg;ep由115.0±1.39mmhg降至99.6±1.17mmhg;sp由204.3±1.98mmhg降至201.4±0.55mmhg(allp0.05)。2不同浓度nahs急性灌流血管钙化大鼠的颈动脉窦区,发现可剂量依赖性的易化血管钙化大鼠csb,使fccb向左下方移位,ps由cal组的0.24±0.01分别升至0.29±0.01(25μmol/l)、0.31±0.01(50μmol/l)、0.34±0.01(100μmol/l)(allp0.05);rd由29.1±0.92mmhg分别增至33.2±0.54mmhg、38.2±0.84mmhg、42.6±0.73mmhg(allp0.05);tp由83.3±1.10mmhg分别降至77.1±1.34mmhg、73.9±1.37mmhg、69.4±1.17mmhg(allp0.05);ep由115.0±1.39mmhg分别降至113.3±1.17mmhg、112.3±1.84mmhg、111.5±0.90mmhg(allp0.05);sp由204.3±1.98mmhg分别降至201.2±1.37mmhg、200.6±1.22mmhg、197.4±1.52mmhg(allp0.05)。结论:H_2S能够显著易化钙化血管压力感受性反射的敏感性。H_2S可能成为调控钙化血管压力感受性反射敏感性,进而改善高血压和防治心血管事件的新靶点。
【关键词】：硫化氢 颈动脉窦压力感受器 血管钙化 内质网应激 高血压 血管弹性
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R543
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文缩写10-11
• 前言11-14
• 材料与方法14-19
• 结果19-22
• 附图22-39
• 附表39-41
• 讨论41-45
• 结论45-46
• 参考文献46-50
• 综述 气体信号分子硫化氢与血管钙化的研究进展50-63
• 参考文献57-63
• 致谢63-64
• 个人简历64

【参考文献】

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1 ;Hydrogen sulfide facilitates carotid sinus baroreceptor activity in anesthetized male rats[J];Chinese Medical Journal;2007年15期

2 ;Imbalance of endogenous homocysteine and hydrogen sulfide metabolic pathway in essential hypertensive children[J];Chinese Medical Journal;2007年05期

3 ;Hydrogen sulfide ameliorates vascular calcification induced by vitamin D3 plus nicotine in rats[J];Acta Pharmacologica Sinica;2006年03期

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本文编号：577033