IL-22对体外培养的小鼠心肌成纤维细胞胶原Ⅰ表达的影响

发布时间：2017-08-06 03:05

  本文关键词：IL-22对体外培养的小鼠心肌成纤维细胞胶原Ⅰ表达的影响

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【摘要】：目的：观察IL-22对体外培养BALB/c小鼠的心肌成纤维细胞胶原Ⅰ的基因转录表达以及其蛋白表达变化的影响,旨在探索IL-22对小鼠心肌成纤维细胞胶原I表达的影响。方法：从1周龄BALB/c小鼠心脏中分离培养心肌成纤维细胞并纯化,培养心肌成纤维细胞并利用第2-4代细胞进行实验。依据形态学以及免疫荧光对心肌成纤维细胞内波形蛋白标记进行细胞鉴定。心肌成纤维细胞应用不同浓度IL-22刺激48h后,提取细胞的mRNA并逆转录为cDNA后使用荧光定量PCR检测心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原前α链(COL1A1)mRNA的表达变化；使用免疫荧光标记心肌成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白并于荧光显微镜下拍照,然后使用软件对图像进行分析,以测量光密度值来检测Ⅰ型胶原蛋白的表达变化。结果：1、用1ng/mL IL-22刺激48小时后心肌成纤维细胞COL1A1 mRNA的表达明显低于对照组(P0.05)；用100ng/mL IL-22刺激48小时后心肌成纤维细胞COL1A1 mRNA的表达明显高于对照组(P0.05)；用100ng/mLIL-22以及100pM S3I-201共刺激48小时后心肌成纤维细胞COL1A1 mRNA的表达明显低于单用100ng/mL IL-22刺激组(P0.01)。2、用1ng/mL IL-22刺激48小时后心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达明显低于对照心肌成纤维细胞(P0.05)：用100ng/mLIL-22刺激48小时后心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达明显高于对照组(P0.05)；用100ng/mLIL-22以及100μM S3I-201共刺激48小时后心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达明显低于单用100ng/mLIL-22刺激组(P0.05)。结论：IL-22不同的刺激浓度对体外培养的心肌成纤维细胞胶原Ⅰ表达调节有差别,低浓度IL-22(1ng/mL)刺激下调其胶原Ⅰ的基因转录以及其蛋白表达,高浓度IL-22(100ng/mL)刺激上调其胶原Ⅰ的基因转录以及其蛋白表达；高浓度IL-22刺激上调其胶原Ⅰ的基因转录以及其蛋白表达可能是通过STAT3信号通路所实现的。
【关键词】：白介素22 心肌成纤维细胞 胶原
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R54
【目录】：

• 个人简历3-5
• 摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 材料以及试剂12-22
• 结果22-25
• 讨论25-33
• 结论33-34
• 参考文献34-38
• 综述一38-55
• 参考文献46-55
• 综述二55-79
• 参考文献64-79
• 附录79-80
• 致谢80-81
• 攻读学位期间发表的学术论文81

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本文编号：628068