氧化苦参碱延迟预处理通过蛋白激酶C对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

发布时间：2017-08-08 18:31

  本文关键词：氧化苦参碱延迟预处理通过蛋白激酶C对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

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【摘要】：目的:观察氧化苦参碱延迟预处理对大鼠缺血再灌注心肌的影响,探究其可能的心肌保护作用及机制。方法:建立大鼠心肌缺血再灌注模型,60只SD大鼠随机分为对照组(IR组)、氧化苦参碱预处理组(OMT组)、氧化苦参碱与白屈菜红碱联合组(OC组)、白屈菜红碱处理组(CHE组)和经典缺血预适应组(IP组)。记录心率、血压、左心室功能等血流动力学参数。再灌注120分钟后,留取动脉血及心脏组织,分别检测血清中LDH、CK-MB,测定心肌组织中NO、SOD活性及MDA含量。HE染色观察心肌组织病理变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况。Pep Tag#174;非放射性蛋白激酶检测系统检测PKC活性。免疫印迹法(Western blotting)检测心肌细胞PKC及ATP敏感钾通道亚基的表达。采用SPSS20.0统计分析软件包分析实验结果,数据以?X±s表示,多组间均数的比较采用One-way ANOVA分析,以P0.05为存在统计学差异的界限。结果(1)血流动力学检测:各组实验动物心率、血压稳定后,左心室收缩压(LVSP)、左室压力最大上升/下降速率(+LVdp/dtmax/-LVdp/dtmin),HR:OMT组高于IR组、IP组(P0.05),OC组、CHE组、IP组与IR组无显著差异(P0.05)。LVSP:OMT组高于IR组、OC组(P0.05),OMT组与IP组无显著差异,其他组间无显著差异(P0.05)。+LVdp/dtmax与-LVdp/dtmin:OMT组高于IR组(P0.05),OMT组与IP组无显著差异,OC组、CHE组与IR组无显著差异(P0.05)。(2)血清及心肌组织相关指标检测:再灌注120分钟后,OMT组LDH、CK-MB和MDA含量显著低于IR组(P0.05),SOD含量显著高于IR组(P0.05)。OMT组LDH及CK-MB含量低于CHE组,OMT组SOD及MDA含量无显著差异。OMT组凋亡指数AI低于I组(P0.05),OMT组凋亡指数与IP组无显著差异(P0.05),OC组、CHE组与IR组凋亡指数无显著差异(P0.05)。(3)心肌组织病理学观察:①HE染色观察:和缺血再灌注组相比,氧化苦参碱预处理组心肌纤维化程度改善,但氧化苦参碱预处理未能明显改善心肌细胞肿胀、排列紊乱、炎性细胞浸润、及毛细血管扩张等情况,主要为I,Ⅱ级病理损伤。②心肌细胞凋亡观察:缺血再灌注组切心肌纤维排列松散,纹理不清,可见心肌纤维化,且视野布满呈深浅不一的棕黑色凋亡细胞(阳性细胞)。心肌细胞肿胀,仅可见少量正常心肌组织细胞。氧化苦参碱预处理组与缺血预处理组心肌细胞排列尚整齐,横纹清晰可见,细胞肿胀较轻,阳性细胞较少。各组凋亡指数:OMT组低于IR组(P0.05)。OMT组与IP组无显著差异,OC组、CHE组与IR组无显著差异(P0.05)(4)PKC表达及活性检测:与缺血再灌注组相比,氧化苦参碱预处理组PKC活性及PKCε表达量显著增高(P0.05)。(5)ATP敏感性钾通道各亚基的表达:与缺血再灌注组相比,氧化苦参碱预处理组KATP亚基Kir6.1表达增强、Kir6.2表达减弱,SUR1表达增强(P0.05),SUR2A、SUR2B表达与缺血再灌注组差异不明显(P0.05)。结论氧化苦参碱预处理对大鼠缺血再灌注心肌损伤有显著保护作用,其机制可能为氧化苦参碱通过调节PKC的活性及ATP敏感性钾通道亚基的表达启动抗氧自由基、抗细胞凋亡等机制有关。
【关键词】：缺血再灌注损伤 氧化苦参碱 缺血预处理 蛋白激酶C ATP敏感性钾通道
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R542.2
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 符号说明8-12
• 前言12-13
• 第一部分氧化苦参碱预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌生化指标的影响13-32
• 材料与方法13-22
• 结果22-29
• 讨论29-32
• 第二部分氧化苦参碱延迟预处理通过蛋白激酶C对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用32-48
• 材料与方法33-41
• 结果41-44
• 讨论44-48
• 结论48-49
• 参考文献49-54
• 综述54-69
• 综述参考文献62-69
• 发表的学术论文69-70
• 致谢70

【参考文献】

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1 李李;小肠缺血预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制的研究[D];中南大学;2006年

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本文编号：641435