AKT和Wnt11双基因联合小鼠骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的机制研究

发布时间：2017-08-16 04:09

  本文关键词：AKT和Wnt11双基因联合小鼠骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的机制研究

  更多相关文章： 基因过表达 抗氧化应激抗凋亡作用 促转化作用小鼠骨髓间充质干细胞 心肌细胞

【摘要】：目的:探讨AKT基因过表达对过氧化氢(H2O2)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞氧化损伤的影响及抗凋亡作用。探讨Wnt11基因过表达对干细胞向心肌细胞转化是否有促进作用。研究转染双基因的干细胞与心肌细胞共培养后是否可转化为心肌细胞。方法:培养干细胞,测慢病毒对干细胞最佳感染率。培养干细胞,转染AKT基因,向细胞培养基中加入不同浓度(25、50、100、200umol/L)的H2O2,培养24h建立氧化损伤模型,每个模型组均包含AKT组、GFP对照组、AKT抑制剂组。细胞流式仪检测干细胞凋亡比例。培养干细胞,转染AKT基因,缺血缺氧条件下培养,并设对照组。24h后细胞流式仪检测干细胞凋亡比例。培养干细胞,转染Wnt11基因,细胞免疫荧光法检测是否有心肌细胞标志蛋白表达阳性细胞,与心肌细胞共培养并观察记录。结果:干细胞凋亡率随H2O2浓度上升而呈上升趋势。25、50umol组凋亡率均低于对照组(P0.05),100umol组的凋亡率略高于空白对照组(P=0.48),AKT抑制剂模型组凋亡率最高(P0.05)。缺血缺氧时,AKT过表达组凋亡率显著低于对照组(P0.05)。细胞免疫荧光方法可以观察到转染Wnt11组有心肌细胞标记蛋白阳性细胞。心肌样细胞与心肌细胞共培养,培养置第三天时,干细胞成为优势细胞。结论:AKT基因有抗氧化应激抗凋亡作用;Wnt11基因有促进干细胞转化为心肌细胞的作用;双基因联合干细胞治疗心肌梗死的设想存在可行性。
【关键词】：基因过表达 抗氧化应激抗凋亡作用 促转化作用小鼠骨髓间充质干细胞 心肌细胞
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R542.22
【目录】：

• 中英文缩略词对照表5-8
• 摘要8-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-12
• 内容与方法12-18
• 1.研究对象12-13
• 1.1 实验材料12
• 1.2 主要仪器和试剂12-13
• 2.内容与方法13-16
• 2.1 转染基因到小鼠骨髓干细胞并检测其是否顺利表达，检测转染病毒后的干殖是否受影响13-14
• 2.2 AKT基因的抗凋亡抗氧化作用的研究14-15
• 2.3 Wnt11基因促进干细胞转化为心肌细胞的研究15
• 2.4 体外培养小鼠心肌细胞15-16
• 2.5 心肌细胞与小鼠骨髓间充质干细胞共培养16
• 3 质量控制16
• 4 统计方法16-17
• 5 技术路线图17-18
• 结果18-21
• 讨论21-26
• 小结26-27
• 致谢27-28
• 参考文献28-31
• 综述31-38
• 参考文献35-38
• 攻读硕士学位期间发表的学位论文38-39
• 导师评阅表39

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本文编号：681351